胞内染色标本

mzzq1993

• 由于病人标本和实验室仪器的原因，对于需要胞内染色的标本可以固定、破膜30min、标记抗体、洗涤后4℃过夜再上机检测吗？
• 固定破膜剂用的是BD的Fixation/Permeabilization solution 和 Perm/Wash™ Buffer
  

niwanmao

大多数标记是可以这么做的，但需要进行一下对比验证才行。

mzzq1993

niwanmao 发表于 2018-3-19 09:12
大多数标记是可以这么做的，但需要进行一下对比验证才行。

我看论坛里说最佳的终止点是固定破膜后，是破膜胞内染色后过夜再上机好呢？还是破膜过夜后再胞内染色上机好呢？

niwanmao

mzzq1993 发表于 2018-3-19 11:08
我看论坛里说最佳的终止点是固定破膜后，是破膜胞内染色后过夜再上机好呢？还是破膜过夜后再胞内染色上机 ...

对，这个步骤是长期保存的最佳时间点。而你只是过夜，所以多数情况下可以在染色后固定过夜。

mzzq1993

niwanmao 发表于 2018-3-19 11:12
对，这个步骤是长期保存的最佳时间点。而你只是过夜，所以多数情况下可以在染色后固定过夜。 ...

老师，有点疑问：您说的在染色后固定过夜，意思是胞内染色后还需要再固定才能过夜吗？不能胞内染色后直接4℃过夜吗？

niwanmao

mzzq1993 发表于 2018-3-19 12:02
老师，有点疑问：您说的在染色后固定过夜，意思是胞内染色后还需要再固定才能过夜吗？不能胞内染色后直接 ...

均可

mzzq1993

niwanmao 发表于 2018-3-19 12:31
均可

好的，谢谢老师

stf1990

倪老师，请教一个问题。那如果胞內染色这一步后，再固定过夜，固定液不会对信号表达产生影响吗？

niwanmao

stf1990 发表于 2019-4-4 18:22
倪老师，请教一个问题。那如果胞內染色这一步后，再固定过夜，固定液不会对信号表达产生影响吗？ ...

建议做一下验证对比。大多数分子可以，但少数可能会有变化。