小鼠脾脏Th17细胞流式检测

张winny

各位老师好！本人想做小鼠脾脏Th17细胞阳性率的检测。打算购买抗体APC-CD3、FITC-CD4、PE-IL-17、还有一个实验室提供的死活细胞染料（具体没了解）共4种，均来自eBioscience。（看了一些文献就加了CD4、IL-17，可流式那边老师说加上CD3比较严谨）
问题是，不晓得这样的荧光素搭配是否合理？还是有更好的搭配方式？
还有就是对照设置的问题，打算设
1：CD3、CD4、IL-17、死活染料
2：CD3、CD4、IL-17同型对照、死活染料
请问还需要设其他抗体的同型对照、单管对照之类的吗？本人新手一枚，望老师解答，谢谢。

niwanmao

搭配可以的。
不过死活染料需要明确一下，通道是否会和这三个荧光抗体重叠。
至于对照，不需要，因为这三个标记的分群都是很好的，如果分不开，就是做的有问题。

张winny

niwanmao 发表于 2018-4-24 08:05
搭配可以的。
不过死活染料需要明确一下，通道是否会和这三个荧光抗体重叠。
至于对照，不需要，因为这三个 ...

明白，谢谢老师~