注意，CD19 CAR-T治疗后这类细胞容易对MRD分析产生较大干扰

niwanmao

Wenbin Xiao等人以CD19 CAR-T治疗9名5～25岁复发难治性B-ALL患者，发现在这些患者在治疗过程中出现一类不寻常的造血前体细胞，在论文《Early recovery of circulating immature B cells in B-lymphoblastic leukemia patients after CD19 targeted CAR T cell therapy: a pitfall for minimal residual disease detection》中，作者总结了这些细胞表型：

CD45、CD19、CD20、CD10、CD9(bright)
CD22、CD24、CD38(moderate)
CD58(dim)
CD34－
表面轻链多克隆性表达

下面来看图，第一张图是正常骨髓B系分化轨迹，而外周血中CD10＋B非常罕见，而患者在CD19 CAR-T治疗后（C-E图），外周血中CD10＋B就大量出现：



这类细胞最早在治疗后3天开始出现，可持续3个月，大约占总循环B细胞的73％（52～83％），对平时在临床上用于危险分层、治疗决策的MRD检测产生困扰。这类细胞之所以容易与MRD混淆是因为其表面CD10、CD20共同高表达，而从这些细胞的表型CD45、CD20高表达、多克隆性轻链、CD10虽然高表达但略弱于正常造血前体细胞、CD38高表达、CD34－，可推测这些细胞对应于immature/transitional B cell hematogones，并且这些表型与初发表型是不同的。

看文字可能还是很难理解，直接来看其中一名患者的骨髓和外周血，A图是治疗前患者骨髓流式，红色为白血病细胞，蓝色为正常末期B细胞，B图是CAR-T治疗60天的骨髓，MRD阴性，除了正常B系前体外，蓝色就是这类immature/transitional B cell hematogones，处于正常分化轨迹上，轻链多克隆，而CD10弱于中期B和早期B，并且与初发表型完全不同。同样，在C图外周血样本中，也可以明显看到这类细胞：




在下面这例进行二次CAR-T治疗的患者中，可见其第二次CAR-T治疗后（D-E）患者骨髓和外周血中，这类细胞（蓝色）和MRD（红色）并存的情形：




所以，对于CD19 CAR-T患者，以基于LAIP（白血病相关表型）的DfN（Different from Normal）法进行MRD分析，是非常有必要的。对于一些疑难病例，例如CD19转阴者，可考虑采用Cherian等人提出的CD22、CD24管设门。


参考文献：Xiao W, Salem D, McCoy C, Lee D, Shah NN, Stetler-Stevenson M, Yuan CM. Early recovery of ciruclating immature B cells in B-lymphoblastic leukemia patients after CD19 targeted CAR T cell therapy: a pitfall for minimal residual disease detection. Cytometry B Clin Cytom 2018;94B3

田先生

就是说以后碰到这种情况，这群细胞不能认为是异常的残留细胞对吗？

niwanmao

田先生 发表于 2018-5-30 16:37
就是说以后碰到这种情况，这群细胞不能认为是异常的残留细胞对吗？

对，因为这类细胞是正常的，并且分化轨迹也是正常的。