请指正一下我的配色方案

immunology

因为需要分的细胞群比较多，有CD4，CD8，MDSC，Treg，巨噬等，用Canto plus上机，自己配了10个marker的颜色。请老师们指正一下，看看这么配色是不是可以。     滤光片信息及我的配色见图。

                               
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immunology

机器信息及配色方案。

niwanmao

immunology 发表于 2018-6-30 20:53
机器信息及配色方案。

死活染料对邻近通道会影响比较大，需要尽量避免邻近通道搭配荧光，所以如果要用死活染料，可能这里的F4/80、CD11b都会不太好测。
我的建议是在紫光通道用死活染料，分成两管，一管MDSC和巨噬，一管Treg和淋巴亚群

ghqiu09

颜色太多了调补偿都是一个麻烦事，PEcy7和AF750可能都没法一块染，看峰图在633nm激发光两个的荧光比较接近

niwanmao

ghqiu09 发表于 2018-7-2 09:43
颜色太多了调补偿都是一个麻烦事，PEcy7和AF750可能都没法一块染，看峰图在633nm激发光两个的荧光比较接近 ...

这两个倒是可以一起用，我们平时都在用，虽然荧光峰值接近，但是光路设计好就没问题。

CART

niwanmao 发表于 2018-7-2 08:27
死活染料对邻近通道会影响比较大，需要尽量避免邻近通道搭配荧光，所以如果要用死活染料，可能这里的F4/8 ...

倪老师，最近一直被死活染料的问题困扰。我之前选的AF750通道，结果发现它不仅对周围通道影响大，对PERCP-cy5.5和PE-CY7影响也很大。我的机子是贝克曼的cytoflex，通道和楼主的基本一致，是405、488和638三个激发光，12个通道。我需要设计一个8色方案，现在因为死活染料的影响，可选择的通道很少了。想问下老师对死活染料通道的选择有什么建议吗？另外，8色方案一般优先考虑哪些通道？谢谢老师

niwanmao

CART 发表于 2022-5-8 23:45
倪老师，最近一直被死活染料的问题困扰。我之前选的AF750通道，结果发现它不仅对周围通道影响大，对PERCP ...

这台机器的配置是可以观察到AF750对PC5.5、PC7有较大影响的。

优先建议用在405通道吧，那里相对好一些。

CART

niwanmao 发表于 2022-5-9 08:28
这台机器的配置是可以观察到AF750对PC5.5、PC7有较大影响的。

优先建议用在405通道吧，那里相对好一些。 ...

感谢倪老师的回答。那我有另外一个疑问，如果死活染料定在405通道的话，那相邻的506,610和645还好使吗？如果按优劣排序的话，他们的优先使用顺序是怎样的？还望老师能点拨一下

niwanmao

CART 发表于 2022-5-9 18:04
感谢倪老师的回答。那我有另外一个疑问，如果死活染料定在405通道的话，那相邻的506,610和645还好使吗？ ...

能不用，尽量不用相邻通道。

实在要用，可先做两两搭配测试，看看对邻近通道的补偿是否可控。

CART

niwanmao 发表于 2022-5-9 18:19
能不用，尽量不用相邻通道。

实在要用，可先做两两搭配测试，看看对邻近通道的补偿是否可控。 ...

明白了，谢谢倪老师的回答