求解。细胞周期结果没有S期，是什么原因

sinouk

我做的细胞周期，用FLOWJ分析结果。为什么找不到S期。求解。
操作过程
1、取细胞，胰酶消化，离心后70%乙醇固定
2、过夜，然后 1000转/分 离心1分钟，去乙醇，用PBS，洗一下
3、放入RNASE A酶   37度  孵育 30min
4   加入PI 染液    37度  孵育30min
上机检测。结果上为什么看不到S期。

sinouk

用的是迈瑞BRICYTE E6机型。

niwanmao

FSC/SSC和FL2-A/FL2-W散点图分别怎么样？

sinouk

您一问我，再看一下散点图，其中一个没选DNA-W，后来换成了DNA-W为X轴，立马分析结果图就变了。可是G1  G2那么小，S那么大是怎么回事

sinouk

为什么结果总变，我又重新选了一下，原始结果没变，只是分析时选的散点图和门变了，结果又变了。这是为什么？

博古书生

PI我一般孵育10min左右，你孵育过程中混匀两三次保证染料与PI的充分接触。从你圈出来的比例来看，碎片比例有20%太高了，说明处理过程有问题。另外你问下这个仪器通道二是不是500多的激光(虽然可能性不大)。你第二次的结果FSC—SSC电压太高了，细胞都跑出去了，你圈的位置应该是碎片的位置。

livan724

要看DNA-A的信号