关于钙离子荧光强度

hnnyyss · 发表于 2018-8-20 22:43:31

阴性对照

检测样本

初学流式，问题比较多，请教：以上是用fluo-4探针检测细胞内钙离的阴性对照（不加探针）和检测样本分析结果，想知道检测样本的荧光强度MFI到底是看M2中的mean值，还是看ALL中的mean值，抑或是M2-M1（检测样本），或者是M2-M1（阴性对照），另外荧光强度指数怎么计算，最后阴性对照的图像不是从坐标原点开始的是什么原因，望各位大神流式解惑，谢谢

niwanmao · 发表于 2018-8-21 07:53:22

不知道这个帖子你看过没有：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6195-1-1.html
MFI指的是整群细胞的MFI，只是应该按照时间来设门

hnnyyss · 发表于 2018-8-21 09:23:10

倪老师好，我的实验目的是想通过荧光强度比较不同检测样本中圈门内的细胞内钙离子浓度的差别，不知道这样合不合适，该怎么比较

hnnyyss · 发表于 2018-8-21 09:24:34

检测基础钙离子浓度的差别，不加刺激因素

niwanmao · 发表于 2018-8-21 10:12:21

hnnyyss 发表于 2018-8-21 09:23
倪老师好，我的实验目的是想通过荧光强度比较不同检测样本中圈门内的细胞内钙离子浓度的差别，不知道这样合 ...

也一样，圈中目标细胞群后，比较该群细胞所有信号的MFI。

hnnyyss · 发表于 2018-8-21 10:36:32

谢谢倪老师，还想知道检测样本的荧光强度MFI到底是看M2中的mean值，还是看ALL中的mean值，抑或是M2-M1（检测样本），或者是M2-M1（阴性对照）

niwanmao · 发表于 2018-8-22 07:45:55

hnnyyss 发表于 2018-8-21 10:36
谢谢倪老师，还想知道检测样本的荧光强度MFI到底是看M2中的mean值，还是看ALL中的mean值，抑或是M2-M1（检 ...

首先圈中目标细胞群体后，然后看该群体ALL的Geomean

hnnyyss · 发表于 2018-8-22 22:00:46

如果是“圈中目标细胞群体后，然后看该群体ALL的Geomean”的话，困惑的是设置阴性对照是不是没有太多意义，因为阴性对照除了检测时调节电压外还可以扣除自发荧光等本底，不知道我的理解是否正确

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