Annexin V-FITC细胞凋亡检

pxt9098 · 发表于 2018-9-11 11:23:16

刚做流式，想向大家请教几个问题：
1. 我的药物未处理组（第一张图）同时被FITC和PI标记上了，原因是什么？
2. 加药组的FITC/PI图，是细胞团没有分开吗？是因为补偿调的不好吗？

药物未处理组

加药组

pxt9098 · 发表于 2018-9-11 11:27:28

未加药组

药物处理组
刚才的图发错了

niwanmao · 发表于 2018-9-11 17:35:50

pxt9098 发表于 2018-9-11 11:27
未加药组

                           药物处理组             ...

AV/PI这样的分布，感觉像是非特异性似的。
圈左侧FSC较大的一群看看是否有变化？

pxt9098 · 发表于 2018-9-12 08:39:06

niwanmao 发表于 2018-9-11 17:35
AV/PI这样的分布，感觉像是非特异性似的。
圈左侧FSC较大的一群看看是否有变化？ ...

老师，圈左侧的情况是这样的

niwanmao · 发表于 2018-9-12 10:58:57

pxt9098 发表于 2018-9-12 08:39
老师，圈左侧的情况是这样的

右侧这群呢？

pxt9098 · 发表于 2018-9-12 12:50:46

这是右侧的

sunny2829 · 发表于 2018-9-27 11:13:13

您检测的是贴壁细胞还是悬浮细胞呀？
补偿有没有调好，看下单染的流式图，一般横平竖直，就没问题。

pxt9098 · 发表于 2018-9-28 11:38:46

sunny2829 发表于 2018-9-27 11:13
您检测的是贴壁细胞还是悬浮细胞呀？
补偿有没有调好，看下单染的流式图，一般横平竖直，就没问题。 ...

我检测的是贴壁细胞，想请教一下调补偿的样品应该怎样制备？55℃水浴30min吗？

sunny2829 · 发表于 2018-9-28 11:58:49

单阳 1：Annexin V 凋亡诱导剂处理细胞。55℃30min这个方法我没用过，有老师用过，具体条件（温度时间）需要摸索。
单阳 2 ：PI 取一半细胞加入 4% 多聚甲醛固定 ( 使细胞死亡 )，离心洗
涤后同另一半正常活细胞混合，再标记

pxt9098 · 发表于 2018-9-28 14:29:52

sunny2829 发表于 2018-9-28 11:58
单阳 1：Annexin V 凋亡诱导剂处理细胞。55℃30min这个方法我没用过，有老师用过，具体条件（温度时间） ...

好的谢谢，下次做的时候改进一下

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