粘连信号，裂红，blank杂细胞问题

liu_liuxn

1. 刚开始做流式，取的是整个股骨剪碎的标本，请问各位大神，在处理粘连信号时，应该按照图2画门还是应该按照图3画门？

2.流式如果没有裂红，像网上说的自发荧光或者稀释目标细胞的程度有多大，会严重影响实验结果吗？

3.如果研究的细胞群体非常稀少，根本拉不开两群细胞，如何确定阳性信号阈值？

4.在VEGF2与CD31门内，blank组出现了如下图右边的一大片细胞，不是没染色吗。。。而且已画非常严格strict的活死门，这是怎么回事？


问题很多，希望能和大家共同学习提高哈哈。

niwanmao

1、可以用图3方式画，但这样的分布，总感觉机器有点问题。
2、裂红与自发荧光无关，也不会稀释目标细胞，因为最后裂解液会通过离心去除的。
3、研究的群体非常少，就必须要获取到足够量的有效细胞，如果是万分之一的比例，尽量获取到50万以上。
4、图中这些阳性信号是非特异性染色或噪音信号，在多色流式中特别容易见到，所以需要注意排除。

liu_liuxn

niwanmao 发表于 2018-9-19 07:55
1、可以用图3方式画，但这样的分布，总感觉机器有点问题。
2、裂红与自发荧光无关，也不会稀释目标细胞，因 ...

太谢谢老师了！希望有一天也能为网站做出贡献！