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老师好,最近做流式发现,细胞固定破膜以后很难用活细胞的速度离心下来,我做淋巴细胞的,一般淋巴细胞我是1700rpm,离心5min。但是胞内染色的话,这个速度离不下来细胞,看不到明显的细胞沉淀,因为细胞已经破膜,会比较小。细胞损失很多。然后我又试了固定破膜之后后续所有的步骤都用8500g 3min,这样子细胞是都可以离心下来,没什么细胞损失,但是上流式却发现这样做,离心速度太大,造成了不少细胞粘连,感觉有少一半的细胞都不是单细胞状态了。请问这个问题怎么解决 呢?
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