全血或PBMC冻存

毛豆24821

在站内搜集PBMC冻存和复苏的相关资料，由于复苏率较低（50%），建议是可以直接冻存全血，复苏后再用Ficoll分出PBMC，进行染色上机。
想详细请教各位，
1：全血冻存和复苏是具体怎么操作？因为没做过全血冻存，如果可以详细些，感激不尽！
2：如果直接冻存PBMC，50%FBS+50%DMSO可以吗？PBMC复苏可以用10%FBS+90%1640吗？
3：文献说PBMC复苏后培养1小时再染色上机，状态最佳？

非常感谢

niwanmao

站内有个精华帖，里面应该可以找到答案：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-827-1-1.html

毛豆24821

niwanmao 发表于 2018-11-22 08:59
站内有个精华帖，里面应该可以找到答案：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-827-1-1.html ...

帖子看过了。。都是关于PBMC分离，如果有了解全血和PBMC冻存及复苏相关部分的欢迎分享。

niwanmao

毛豆24821 发表于 2018-11-22 14:32
帖子看过了。。都是关于PBMC分离，如果有了解全血和PBMC冻存及复苏相关部分的欢迎分享。 ...

全血冻存肯定影响很大的，因为红细胞破碎后，代谢产物影响特别大。

逗比猫

想请教个问题，看了站内很多大神写的都是人的全血以及PBMC的处理，想请教下，BALB/C小鼠的PBMC是否可以获得，有没有相关的处理方法。

niwanmao

逗比猫 发表于 2018-12-7 15:10
想请教个问题，看了站内很多大神写的都是人的全血以及PBMC的处理，想请教下，BALB/C小鼠的PBMC是否可以获得 ...

挺难提取的，因为小鼠的血量少。一般如果能取到500ul以上，可以试试提取。
但如果能用全血标记，还是建议全血

逗比猫

niwanmao 发表于 2018-12-9 20:40
挺难提取的，因为小鼠的血量少。一般如果能取到500ul以上，可以试试提取。
但如果能用全血标记，还是建议 ...

谢谢倪老师