小鼠血清封闭引起的CD19非特异性染色

cpu北极熊

      细胞使用的是CYTO TROL 质控细胞       1：使用-20直接拿出的冻存正常小鼠血清（NMS），室温溶解后直接用来封闭，发现明显的CD19非特异性染色；

      在咨询之后，猜测是没有正常融化血清的原因，为了验证是否是小鼠血清的影响，在之后对比了加入血清（室温溶解，4℃放置5小时后）封闭和不       使用血清封闭：
       2：血清（室温溶解，4℃放置5小时后）封闭，效果有所改善；
       3：不使用血清封闭的结果，结果较好。

      以前正常血清放置在4℃缓慢融化，未出现非特异性染色的结果，想问为什么直接室温融化的小鼠血清会造成严重的CD19非特异性染色，同时染的CD3，CD4，CD45等未出现这种情况，非常疑惑，希望能得到大佬的解释。（没有直接的图片，只能手画示意，望谅解）

Jeff

额，为什么不适用商品化的封闭剂呢？我们流式通常所说的封闭是封闭细胞表面的FCR，这个属于特异性封闭的，FCR通常表达的是CD16/CD32，所以，大家在流式过程中，更加建议使用特异性的商品化封闭剂，得到的结果才可能更准确。也有听过使用血清、血浆来封闭的，但据了解效果不是特别好~~~（这种情况，一般出现在比较特殊的样本，才会使用血清血浆来封闭，猴，猪，马的不常见的样本）。若有什么不对的地方，麻烦指正下