关于ROS中P1和P2如何设置

落花微雨

各位老师，我想请教一下关处理ROS数据时的相关问题。试剂盒用的是碧云天的，在BD Accuri C6的机子上测的，图1和图2是flowjo处理的结果，图3和图4是BD上面的原始图片。（1）拉线画门是依据什么设置的呢？如1和图2，我拉线的位置不同，导致所占的细胞比例相差特别大？所以应该怎么拉线呢？（2）如图3和图4，我圈门后，ROS显示是单峰，如果不圈门就显示双峰了。。。我觉得我圈门可以排除掉细胞碎片，但是不知道自己圈的是否有问题？

niwanmao

ROS实验的设门，可通过不染色的样本设置，参考：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6600-1-1.html
但像你这个结果不分群，首先看看是否染色或试剂有问题，如果确认没问题，对于单峰的结果，可以直接对比荧光强度值变化。

至于设门，还是要圈中活细胞分析。

leosurely

ros的结果单峰是正常的，对比荧光强度值的变化。双峰一般是细胞活性差异较大造成的，如果细胞活性一致只有一个单峰，当细胞活性下降时会有双峰。

落花微雨

niwanmao 发表于 2018-12-27 08:40
ROS实验的设门，可通过不染色的样本设置，参考：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6600-1-1.html
但像你 ...

感谢老师的解答！就是老师说的“对于单峰的结果，可以直接对比荧光强度值变化”，对于单峰情况下，这里荧光强度的变化是指M1下的Geometric Mean吗？用M1下的百分比直接对比可以吗？

落花微雨

leosurely 发表于 2018-12-27 10:53
ros的结果单峰是正常的，对比荧光强度值的变化。双峰一般是细胞活性差异较大造成的，如果细胞活性一致只有 ...

感谢老师的解答，看样子ROS是可以有单双峰两种情况的呢。