在做巨噬细胞极化时单染管全为阳性怎么调节补偿

dengweibo1112

1、首先想请教做巨噬细胞极化时，用CD14圈巨噬细胞，CD80作为M1标志，CD163作为M2标志，可以？

2、在上机调节补尝时，单染管CD80和单染管CD163几乎全为单阳性，没有参照不知怎么调节补偿。

3、为了让单染管中出现阴性细胞群，则圈取了非目的细胞群（淋巴细胞），但以此阴性群最为参照，调节补偿后，实验管的结果偏差太大（细胞群明显异常），不知怎么做才能调好补偿。

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单染管染好之后加些阴性细胞一起上机？

niwanmao

1、这三个标记比较粗，但大致可用。
2、可用与CD80、CD163相同荧光素的CD14，做单标，调节补偿。
3、淋巴细胞和巨噬细胞由于SSC、FSC相差甚大，所以做参照，会有一定偏差，调节补偿还是用第2种所说的方法来做，同时上机前加入未标记的巨噬细胞做阴性参照。

dengweibo1112

niwanmao 发表于 2019-3-9 09:46
1、这三个标记比较粗，但大致可用。
2、可用与CD80、CD163相同荧光素的CD14，做单标，调节补偿。
3、淋巴细 ...

好的，谢谢倪老师，我试试看

liuruiluna

全为阳性好办呀，留点不染色的细胞，在染色之后加进去充当阴性细胞，比全为阴性的好解决

dengweibo1112

liuruiluna 发表于 2019-3-27 17:39
全为阳性好办呀，留点不染色的细胞，在染色之后加进去充当阴性细胞，比全为阴性的好解决 ...

多谢！可以一试！