isotype的使用问题

bear_honey

倪老师及各位站友，有个问题关于isotype的问题请教下，在一个多色实验中需要使用多支不同颜色的isotype对照，isotype对照是加在同一管中进行染色，还是分成不同的管，每管一个isotype，我怎么想都觉着放在一起好像也不太合适，分成一管一管的也不太合适。有如下几种情况，
1，isotype是同样来源的，比如都是 mouse igg1的
2，isotype不同来源，比如一个mouse igg1，一个rat igg1之类的
如果放在一起，不同isotype之间相当于是互相竞争的关系，即使不同物种来源的，也是有这个问题，这样isotype信号是不是不太准。。。如果不放在一起，一管一管做isotype，真正的样品又是多个抗体放在一起染的，这样会不会也不是很好，我个人比较倾向于一管一管染isotype，不知道这个问题有没有标准的解释，谢谢啦

niwanmao

如果你是希望设门，最优选择是生物学阴性对照，其次是用Fc Block之后，做FMO对照。
同型对照，不到非不得已，不建议用。