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[结构和原理] 流式CV值问题

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发表于 2019-3-27 15:32:43 | 显示全部楼层 |阅读模式

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问一个比较“傻瓜”的问题,为什么在使用流式之前要保证信号的CV值比较小呢?CV值除了能反应系统稳定性外,还与哪些因素有关呢?如果我的CV值比较大,Drop delay又没有问题,那么能正常分选吗?或设好门以后,能分到我想要的细胞吗?
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发表于 2019-3-27 17:29:33 | 显示全部楼层
首先得看 CV值大是大到什么程度, 流式仪的质控报告有没有pass。 在一定范围内是可以接受的(我以前的记忆中5%以下比较OK)当然,在质控pass的 前提下CV能越小越好。 drop delay体现CV值吗,CV就算很小,drop delay不准,分选的细胞也会shot 得不准? 如果在低速条件下,CV值都还很大,应该考虑是否有堵喷头或者激光需要去矫正光路。(所以可以先好好清洗,质控仍然不够,可以找工程师检查光路)。   
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 楼主| 发表于 2019-3-27 19:25:03 | 显示全部楼层
liuruiluna 发表于 2019-3-27 17:29
首先得看 CV值大是大到什么程度, 流式仪的质控报告有没有pass。 在一定范围内是可以接受的(我以前的记忆 ...

工程师直接告诉我,CV值越小越好。但没明白的是,只要不是环境引起的CV值变化较大,如果自动计算液滴延迟都通过了,不就能分选了吗,只要圈中想要的细胞就可以了啊。怎么回事?
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发表于 2019-3-28 13:47:20 | 显示全部楼层
私学者 发表于 2019-3-27 19:25
工程师直接告诉我,CV值越小越好。但没明白的是,只要不是环境引起的CV值变化较大,如果自动计算液滴延迟 ...

我没做过分选,所以这里仅做一些理论上的讨论,请勿见怪。

从原理上说,Drop Delay反映的是液滴分割是否正确,CV值反映的是信号分布变异度,如果两者均精确,则说明分选的精度高,Drop Delay过关了,液滴分割过关,但如果CV大,说明细胞之间还是存在较大污染的可能性。
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 楼主| 发表于 2019-3-28 21:35:34 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-3-28 13:47
我没做过分选,所以这里仅做一些理论上的讨论,请勿见怪。

从原理上说,Drop Delay反映的是液滴分割是否 ...

是的,CV值大,说明信号采集或样品本身还存在问题,有篇文章介绍说的是:CV值是关于光路元件对齐样品流路的函数,就是说,对得越齐,CV值越小。那么对得不是很齐,只要在图中圈出目标细胞是不是就可以了啊,也就是不必要求CV越小越好呢?
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 楼主| 发表于 2019-3-28 21:38:55 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-3-28 13:47
我没做过分选,所以这里仅做一些理论上的讨论,请勿见怪。

从原理上说,Drop Delay反映的是液滴分割是否 ...

是的,CV值大,说明信号采集或样品本身还存在问题,有篇文章介绍说的是:CV值是关于光路元件对齐样品流路的函数,就是说,对得越齐,CV值越小。那么对得不是很齐,只要在图中圈出目标细胞是不是就可以了啊,也就是不必要求CV越小越好呢?同样只做分析是不是CV也不必要求太高,满足观测要求即可?
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发表于 2019-3-29 22:26:03 | 显示全部楼层
CV和drop delay看的不是一个事儿。你可以理解为,CV值 是看辨识这个细胞是不是你要的细胞的准确度, drop delay看的是机器要shot 细胞的时候,加电荷的时机对不对。两者不是一回事
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 楼主| 发表于 2019-3-29 23:45:34 | 显示全部楼层
liuruiluna 发表于 2019-3-29 22:26
CV和drop delay看的不是一个事儿。你可以理解为,CV值 是看辨识这个细胞是不是你要的细胞的准确度, drop d ...

好的,谢谢
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