用PMA刺激小鼠脾脏T细胞，是否会引起CD4分子的内吞？

小白12345 · 发表于 2019-4-17 15:44:55

请问各位老师，小鼠脾脏细胞Th1/2/17的流式检测上机前，需要用刺激剂增加细胞因子的分泌，如果选择了PMA和离子霉素，表面CD4+会内吞而导致检测不到，需要用CD3和CD8来设门，因为查了资料说，PMA会对人外周和小鼠胸腺细胞有作用，对外周T细胞作用不明显，不太了解，脾脏T是否属于外周T，脾脏分选细胞或者极化培养后的细胞，用PMA后会不会引起CD4的下降，是否也需要用CD3和CD8来设门。期待老师的解答，谢谢

niwanmao · 发表于 2019-4-18 08:06:47

跟哪种T细胞无关的，其机制和解决方案请参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4750-1-1.html

小白12345 · 发表于 2019-4-18 10:22:51

niwanmao 发表于 2019-4-18 08:06
跟哪种T细胞无关的，其机制和解决方案请参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4750-1-1.html ...

谢谢倪老师能回复我，谢谢

mybiosciences · 发表于 2019-6-26 11:11:17

有明确免疫原的，请不要用pma/离子霉素刺激

stf1990 · 发表于 2019-6-26 23:09:02

你可以用PMA来刺激，但是我建议你把anti－CD4跟其他细胞因子抗体在透膜时一起染色, 同时CD4抗体建议用BV－421，信号会更好。之前我遇到同样的问题

qingshi · 发表于 2019-9-21 22:37:48

明确的告诉你，CD4会被吃的一干二净。

行棋无悔 · 发表于 2019-9-22 08:56:20

qingshi 发表于 2019-9-21 22:37
明确的告诉你，CD4会被吃的一干二净。

你好，CD8分子在刺激后是否也会出现这种内吞情况呢

niwanmao · 发表于 2019-9-22 17:15:11

行棋无悔发表于 2019-9-22 08:56
你好，CD8分子在刺激后是否也会出现这种内吞情况呢

CD8不会。
CD4的内吞机制，站内以前介绍过：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4750-1-1.html

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