请教CFSE检测T细胞增殖的技术问题？

cellprobe · 发表于 2019-4-22 23:10:54

我用CFSE标记T细胞，然后和MDSC共培养，检测MDSC对T细胞增殖情况的影响。
T细胞还需要用CD3抗体标记吗？
FSC/SSC的散点图，可以通过圈门的方式区分T细胞和MDSC吗？
谢谢！

tiger · 发表于 2019-4-23 09:18:23

本帖最后由 tiger 于 2019-4-23 09:21 编辑

不需要，阈值设CFSE就可以了。如果不放心，加个CD3更保险。

cellprobe · 发表于 2019-4-23 15:00:15

tiger 发表于 2019-4-23 09:18
不需要，阈值设CFSE就可以了。如果不放心，加个CD3更保险。

怎么设置CFSE的阈值？

cellprobe · 发表于 2019-4-23 15:00:56

tiger 发表于 2019-4-23 09:18
不需要，阈值设CFSE就可以了。如果不放心，加个CD3更保险。

而且是怎么计算的？

tiger · 发表于 2019-4-24 09:38:11

cellprobe 发表于 2019-4-23 15:00
而且是怎么计算的？

在CFSE的直方图中，显示全部细胞，可看到两部分细胞，CFSE阳性和阴性的，把阳性的荧光调至最高，逐渐调高FL1的阈值，直至阴性细胞不显示即可。

嘻嘻嘻嘻 · 发表于 2019-4-24 11:35:18

不用在加CD3抗体，只需要用CFSE 就可以了

cellprobe · 发表于 2019-4-25 23:49:29

tiger 发表于 2019-4-24 09:38
在CFSE的直方图中，显示全部细胞，可看到两部分细胞，CFSE阳性和阴性的，把阳性的荧光调至最高，逐渐调高 ...

抱歉还是不太明白呀

niwanmao · 发表于 2019-4-26 08:30:15

cellprobe 发表于 2019-4-25 23:49
抱歉还是不太明白呀

还是建议加个CD3区分出T细胞，然后再分析其CFSE增殖稀释的情况。

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