谢谢您的答复!A565是检测这个染料的吗?我看了Thermo的说明书,有个计算公式A = εcL,ε是extinction coefficient,Thermo给出的数值是1960000 M-1 cm-1,不知道这个数值如果我用其他品牌的试剂盒能不能用?A280的话好像是测蛋白浓度的,但是要减去A565漏过去的吸光值,就跟荧光补偿一样,这边就有一个correction factor,这个值我不知道去哪里查,请参考下面的公式:
Protein concentration (mg/ml) =[A280 – 0.03(A650)] × dilution factor/A280 of protein at 1 mg/ml
In this equation, 0.03 is a correction factor for the fluorophore’s contribution to the A280