大体积裂解法，获取大量白细胞，做稀有细胞研究

niwanmao

平时，我们进行流式细胞染色时，通常都是100ul的体积，但是有时候，我们需要大量细胞的时候，即使浓缩了血样，仍然无法达到需要的细胞量，怎么办？

可以尝试先把红细胞裂解掉，那么如何裂解最好？EuroFlow推荐了一个BulkLysis法（即大体积裂解法），便于大家获取充足量的白细胞（100ul可达到10E7细胞量），主要用于需大量细胞的微小残留病检测，也适用于其它检测稀有细胞的实验。

视频请访问：https://v.qq.com/txp/iframe/player.html?vid=g0871ho8sk0
请注意观看细节，氯化铵裂解液的配方，论坛上有。

niwanmao

mikemaosi4396 发表于 2024-1-9 16:07
对的，没有加任何抗体，那我可以加个死活染料排除死细胞，看是否是这个因素的影响 ...

不一定可以，有时候跟染料粘连也会有关，分析时直接排除即可

mikemaosi4396

倪老师，我使用氯化铵裂解液大体积裂解，单核细胞群在FITC的通道上有一群阳性信号，这是什么情况

niwanmao

mikemaosi4396 发表于 2024-1-9 13:09
倪老师，我使用氯化铵裂解液大体积裂解，单核细胞群在FITC的通道上有一群阳性信号，这是什么情况 ...

意思是FITC没有加任何抗体，却出现了一个小群，是吧？这样的话，还是得考虑非特异性的荧光，可能是跟死细胞相关。

mikemaosi4396

niwanmao 发表于 2024-1-9 15:38
意思是FITC没有加任何抗体，却出现了一个小群，是吧？这样的话，还是得考虑非特异性的荧光，可能是跟死细 ...

对的，没有加任何抗体，那我可以加个死活染料排除死细胞，看是否是这个因素的影响

mikemaosi4396

niwanmao 发表于 2024-1-9 17:05
不一定可以，有时候跟染料粘连也会有关，分析时直接排除即可

刚才尝试了取出细胞粘连，这群非特异性荧光的信号基本无了，感谢！