为什么CD4和CD8分群图这么奇怪？

little

我是从小鼠肺组织消化细胞后，进行免疫细胞内细胞因子刺激，再进行表面抗原和细胞内因子染色。常规圈门，从CD45+细胞分CD4+和CD8+群。如图所示，请问出现很长的怪异图是什么原因？补偿调过了？或是电压的问题？求指点。

niwanmao

一般这种怪异的图形大多数是由于补偿、logicle的w参数太大等原因造成，不过你这里确实分群有问题，是否在正常人外周血上面验证过方案？

little

niwanmao 发表于 2019-8-15 08:19
一般这种怪异的图形大多数是由于补偿、logicle的w参数太大等原因造成，不过你这里确实分群有问题，是否在正 ...

我没有在人外周血细胞验证过。这个方案是从别人实验室成熟的实验方案拷贝过来的。如果方案没有问题，那就是我补偿调得问题吧？下次应该往哪个方向调一下？

niwanmao

little 发表于 2019-8-17 03:42
我没有在人外周血细胞验证过。这个方案是从别人实验室成熟的实验方案拷贝过来的。如果方案没有问题，那就 ...

目前即使配置一样的仪器，同一方案都有可能出点小问题，即使移植方案，还是需要事先摸好条件。
前面没注意到你是做小鼠的，那么也简单的，你用小鼠尾静脉抽点血验证一下配色的可行性、电压、补偿这些条件之后，再去做肺组织的。

little

niwanmao 发表于 2019-8-18 13:33
目前即使配置一样的仪器，同一方案都有可能出点小问题，即使移植方案，还是需要事先摸好条件。
前面没注 ...

谢谢站长的指点。