关于肺组织细胞分离

行棋无悔 · 发表于 2019-9-20 10:04:21

各位老师：
我看到用胶原酶消化肺组织的时候最好要振荡，可以放到摇床中，200rpm的速度振荡吗？这个频率会不会导致细胞损伤过重。

niwanmao · 发表于 2019-9-22 17:14:30

效率最高，效果最好的是，控制消化时间，辅以机械法。

大品咿呀哟 · 发表于 2020-10-19 10:32:15

酶解法消化肺脏组织，37℃摇床180rpm消化40min-60min足以，根据检测细胞的特性再后面进一步处理（比如我们需要单个核会考虑过一下分离液）

hnsyryx · 发表于 2022-6-22 09:33:21

我用的胶原酶I (终浓度1mg/mL)，37℃ 200rpm 消化1h后，细胞计数发现，基本上都是一团一团的粘附在一起，感觉好像细胞死亡了，是酶的浓度过高了，还是消化时间长了？

Climber · 发表于 2022-6-22 10:03:00

hnsyryx 发表于 2022-6-22 09:33
我用的胶原酶I (终浓度1mg/mL)，37℃ 200rpm 消化1h后，细胞计数发现，基本上都是一团一团的粘附在一起，感 ...

时间确实长了，我们的方案还会加DNA酶1，消化半个小时

angellisa · 发表于 2024-2-25 20:26:54

Climber 发表于 2022-6-22 10:03
时间确实长了，我们的方案还会加DNA酶1，消化半个小时

老师您好，我消化半小时下来细胞还是一团一团的黏在一起了，离心后重悬也吹不开，请问是酶没选对吗，我用的胶原酶I和DNAase同时消化

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