U937细胞中检测分化marker--CD14,CD11B

vivi2222

求大神指教：Fortessa仪器检测。U937悬浮细胞。marker：CD14、CD11b(够于Biolegend均为FITC)
                   FACS buffer：PBS+2%FBS+1mM EDTA
                   4度避光染色45min, PI去除死细胞
第一次给药之后做出来CD14阳性细胞显著增加，CD11b没有改变
第二次、第三次给药之后均未出现阳性结果。
药物肯定没问题，换了新鲜的药物同样做不出来。
请问，细胞的代数有关系吗？会不会存在细胞已经分化了的情况，所以给药就没有改变了？
CD11b为什么一直做不出来？
小白跪求大神指教，如果操作有什么不妥之处也请告知，谢谢～

niwanmao

U937，本来就不是成熟细胞，怎么可能表达成熟的CD14和CD11b？

PS：发帖请选择正确的提问版块，不要发在书籍和资料分享版块，本次先帮你转移，谢谢配合。

vivi2222

niwanmao 发表于 2019-9-26 10:24
U937，本来就不是成熟细胞，怎么可能表达成熟的CD14和CD11b？

PS：发帖请选择正确的提问版块，不要发在书 ...

不好意思老师发错地方了。我的药物是促进U937细胞分化的，所以给药之后期望检测到CD14，CD11b阳性

niwanmao

vivi2222 发表于 2019-9-26 10:29
不好意思老师发错地方了。我的药物是促进U937细胞分化的，所以给药之后期望检测到CD14，CD11b阳性 ...

如果后面阳性都没出来，只能说明第一次的阳性可疑吧？？

至于分化的话，还得确定细胞株往哪个方向分化吧，肿瘤细胞株一般都发生变异了，有时候挺难说会不会向正确的成熟细胞分化，我觉得你还是直接拿白血病病人的细胞会不会更好？