小鼠脾脏B淋巴细胞分群检测问题

飞翔 · 发表于 2019-11-14 14:19:33

最近尝试取小鼠脾脏B淋巴细胞，用的是磁珠分选方法，先采用FITC-CD19进行标记分选细胞，加PBS后离心，PBS清洗一次后上机检测。
细胞只有一群，但是CD19+比例很低。正常脾脏B淋巴细胞比例就很高，磁珠分选后纯度应该更好呀，结果不太一致，求大神解惑
图片上可以看到，CD19基本无表达。是细胞问题还是抗体有问题？

dengrui · 发表于 2019-11-14 17:30:43

检测用的CD19抗体克隆号怎么选的？一般来说不能和磁珠分选用的CD19抗体克隆号一样，试剂公司有推荐吗？

飞翔 · 发表于 2019-11-15 08:02:21

dengrui 发表于 2019-11-14 17:30
检测用的CD19抗体克隆号怎么选的？一般来说不能和磁珠分选用的CD19抗体克隆号一样，试剂公司有推荐吗？ ...

试剂是不同厂家的，抗体不是一个厂家的

liuruiluna · 发表于 2019-11-15 09:49:33

一般应该先分选，后标记流式抗体再上机啊，要注意正选试剂盒的抗体克隆号和你分析用的抗体克隆号不能是一样的，正选试剂盒可能会推荐你可用于检测的流式抗体克隆号

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[淋巴细胞亚群] 小鼠脾脏B淋巴细胞分群检测问题

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