JC-1检测线粒体膜电位

duanwenqi

问题：请问JC-1检测线粒体膜电位实验中，需调补偿解决荧光串通道问题，是用带有荧光的微球调吗？我是这样分组的blank（不处理，调电压用），阴性对照（JC-1），阳性对照（CCCP+JC-1），实验组。我觉得其中的阴性和阳性对照不能作为单染管调补偿用，只能用带有荧光的微球调补偿，是这样的吗？

niwanmao

做的好，都应该分得比较漂亮，就是应该用阴性对照和阳性对照来调节。微球在此实验中没用。

chunfeng

niwanmao 发表于 2019-12-11 17:57
做的好，都应该分得比较漂亮，就是应该用阴性对照和阳性对照来调节。微球在此实验中没用。 ...

倪老师，这个实验中jc-1是不是相当于PE单染， CCCP+JC-1相当于 FITC单染。最后利用这两个单阳后来来调补偿。

niwanmao

chunfeng 发表于 2020-10-21 03:16
倪老师，这个实验中jc-1是不是相当于PE单染， CCCP+JC-1相当于 FITC单染。最后利用这两个单阳后来来调补 ...

不是的。加了CCCP之后，会出现明显的一群FL2降低而FL1增强的，但不算单染样本，而是可以看出明显的偏移，所以很好圈门的。

chunfeng

niwanmao 发表于 2020-10-21 15:08
不是的。加了CCCP之后，会出现明显的一群FL2降低而FL1增强的，但不算单染样本，而是可以看出明显的偏移， ...

谢谢倪老师。我总结了一下现在看到的JC-1实验的步骤，不知道对不对。请倪老师指教。实验对照组: 1 阴性对照组:正常养的细胞+JC-1, 调电压使细胞群在右上象限，椭圆形。2 阳性对照组: CCCP处理的细胞+JC-1. 电压可适当调节，让右上象限的细胞出现向下突出的一部分。 3 实验组 ctr ，药物处理组。

倪老师，这样阴性对照组和实验组中的ctr其实是一样的，可不可以省掉ctr组呢