弱弱的问问：怎么做CD4绝对计数？

sugarswallow

因为想计数Treg的绝对数，需要CD4的绝对数乘以Treg的频率。我知道检测HIV就要检测CD4的绝对数，是不是需要特殊仪器吗？

niwanmao

绝对计数是有特殊的试管的，比如BD的TruCount系列，这管子里面有固定数量的微球。

wangyekai

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这种试管我在疾控见过但没用过，但我疑惑的是这微球是提供混匀功能的吗？


   

niwanmao

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这种试管我在疾控见过但没用过，但我疑惑的是这微球是提供混匀功能的吗？

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wangyekai 发表于 2011-3-19 13:00

                               
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微球是用于作为绝对计数的参照，如果是直接用BD的机器，他们有自己的软件直接就能计算出，如果非BD的软件，可以通过公式计算：

Trucount计算公式

wzr19990923

不知道你做的是什么标本。举外周血标本的例子吧：一般情况下我们是Treg占CD4+细胞的百分比，而CD4+细胞是占淋巴细胞的百分比，如果同时有外周血常规计数，直接乘淋巴细胞绝对值就可以了。如果没有血常规，可以显微镜下计白细胞总数，看流式图中的淋巴细胞占白细胞的百分比，再乘就可以了。
例如：Treg/CD4+：2.5%，CD4+占淋巴细胞的比例为40%，淋巴细胞占白细胞的30%，而显微镜下WBC计数为：5×106/ml，那么Treg的绝对数即是：5×106×0.3×0.4×0.025/ml。

mayq163

细胞（/ul）=获取细胞数×Beads总量/Beads获取数，我的理解是，进样时吸取的液体中，Beads的数量与最初流式管中Beads总数的比例等于进样吸取液体中events数量与最初流式管中颗粒总数的比例，这样能算出样本中细胞总数，再根据设门圈定的特定细胞群的比例，计算某一亚群的绝对数。

bslhk

现在绝对计数就两种方法一种是体积法，一种是微球法。现在用的最多的还是微球法的，体积法需要每次校准仪器