找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

查看: 16626|回复: 8

[试剂耗材] PMA及ionomycin配制分装方法

[复制链接]
发表于 2011-3-23 22:15:45 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
小弟新手,很多东西没做过。买回来PMA和ionomycin,一直不知道该怎么分装。网上没查到特别确定的方法,有人说用1ml DMSO将PMA溶解,然后使用1.5ml 无菌EP管将其分装成100份,每份10微升,储存在-20度。每次使用时取一管再用相应溶液稀释,但又要求不要反复冻融。我算了一下,每次使用的量不到10微升,这就必然会有反复冻融的情况出现。不知道这所谓的“反复冻融”的最大次数是几次?还有ionomycin,就更没头绪了。望各位前辈指点!

最佳答案

查看完整内容

哦,我们的活化体系是以前的同仁们配制好了的,PMA是5uL每管,离子霉素10ul每管,使用的时候是PMA20倍稀释后,和离子霉素一样,每毫升培养基各加1ulPMA和离子霉素,0.7ul的gorgistop,PMA的工作浓度时是50ng每毫升
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2011-3-23 22:15:46 | 显示全部楼层
本帖最后由 sugarswallow 于 2011-3-30 09:11 编辑

哦,我们的活化体系是以前的同仁们配制好了的,PMA是5uL每管,离子霉素10ul每管,使用的时候是PMA20倍稀释后,和离子霉素一样,每毫升培养基各加1ulPMA和离子霉素,0.7ul的gorgistop,PMA的工作浓度时是50ng每毫升

点评

这个比较具体。  发表于 2011-3-30 22:24
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2011-3-24 00:18:36 | 显示全部楼层
根据我自己做实验的情况,反复冻融二三次基本没事,第三次用过后废弃即可.

点评

感谢分享经验  发表于 2011-3-25 21:10
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2011-3-24 07:58:40 | 显示全部楼层


配制方法可以参见这本书的相关章节(第15页):http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=128
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2011-3-25 21:02:13 | 显示全部楼层
如果分装太多的话,比如每个管子只有1ul,过一段时间这1ul几乎就都蒸发掉了。
所以建议10ul保存

点评

谢谢建议!  发表于 2011-3-25 21:16
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2011-3-25 21:13:23 | 显示全部楼层
配制方法可以参见这本书的相关章节(第15页):
niwanmao 发表于 2011-3-24 07:58

文章中这么写的:将PMA融于DMSO中,配制成100微克/ml的母液并分装,保存在-20度下(可保存6个月),使用时稀释一百倍。

组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2011-3-27 17:03:26 | 显示全部楼层
按照你描述的方法分装,每次使用时取出稀释,放4℃,一周左右没什么问题,个人经验。
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2011-3-28 11:49:24 | 显示全部楼层
回复 aninawang 的帖子

感谢aninawang
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2016-5-16 13:07:46 | 显示全部楼层
chujindong 发表于 2011-3-25 21:13
文章中这么写的:将PMA融于DMSO中,配制成100微克/ml的母液并分装,保存在-20度下(可保存6个月),使用时 ...

好难过,我的让师姐在-20度放了两年多,现在CD3亚群CD69活化率只有60%了,基本上报废了。除了买新的,还有什么解决办法吗?
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2024-12-25 10:44

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2024 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表