急求流式结果分析

gdmcwjx2000 · 发表于 2011-3-28 10:29:02

本人是在检测人血TH17的表达，使用的是三色抗体：CD4 PE-Cy5、IL-23 p40/p70 PE、IL-17A FITC。其中IL-23 R是TH17细胞膜表达的：

杨燕清-4.pdf (99.1 KB, 下载次数: 48)

1.请问检测如何呢？

2.CD4⁺IL-17⁺/CD4⁺是代表TH17细胞占CD4⁺T细胞比例吧：1.3%，对吗？

3.CD4⁺IL-23R⁺/CD4⁺ 是代表什么呢？

4.CD4⁺IL-17⁺IL-23R⁺ /CD4⁺是代表什么呢？

谢谢不吝赐教！

niwanmao · 发表于 2011-3-28 10:29:03

1、检测结果总体还行，但感觉你的CD4/IL-23这个点图为什么呈火箭状，是因为细胞问题还是补偿未调整到位？
2、CD4⁺IL-17⁺/CD4⁺的意思理解正确，但在图上的1.3％是双阳性细胞占总数的比例，你如果要计算双阳性细胞占CD4＋细胞的比例＝1.3÷（1.3+51.4）。
3、CD4⁺IL-23R⁺/CD4⁺代表CD4、IL-23R双阳性细胞占CD4＋细胞的比例。
4、CD4⁺IL-17⁺IL-23R⁺ /CD4⁺代表CD4、IL-23R、IL－17三种标记均阳性的细胞占CD4＋细胞的比例，这个分析就需要多重设门，例如你先圈中CD4＋细胞，然后在这类细胞中，再圈IL-23R、IL－17双阳性的细胞。

gdmcwjx2000 · 发表于 2011-3-28 21:48:04

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谢谢倪老师的解答！

sugarswallow · 发表于 2011-3-29 21:15:34

感觉这个IL-17的好像不是太好，如果不是补偿的问题，很有可能是死细胞，就会有火箭样的强染色。另外IL-17的荧光强度应该还要强一些，不过还不能发图片，要不我把我的il-17的图片传上来？

niwanmao · 发表于 2011-3-29 21:19:33

sugarswallow 发表于 2011-3-29 21:15

登录/注册后可看大图

感觉这个IL-17的好像不是太好，如果不是补偿的问题，很有可能是死细胞，就会有火箭样的强染色。另外IL-17的 ...

期待图文解说！

sugarswallow · 发表于 2011-3-29 21:27:33

不知道怎么传图？

niwanmao · 发表于 2011-3-29 21:31:28

sugarswallow 发表于 2011-3-29 21:27

登录/注册后可看大图

不知道怎么传图？

点击回复或者引用，在弹出的编辑器上，或者直接在帖子最下方的编辑器上，单击其工具栏上的“高级模式”，就切换到一个高级编辑器，那里面单击“图片”命令按钮可以上传图片。

sugarswallow · 发表于 2011-3-29 21:38:02

本帖最后由 sugarswallow 于 2011-3-30 09:13 编辑

哦，好的！细胞标记的是四标：CD3 FITC +CD4 PER +IL-17PE+IFN-R APC, 显示的图是以CD3划门后的双标！活化后CD4不好染！

sugarswallow · 发表于 2011-3-29 22:14:43

本帖最后由 sugarswallow 于 2011-3-30 09:01 编辑

不过我没有做过IL-23R和il-17的共表达流式，所以不能判断LZ？也许就是这样火箭型的，也许是补偿的问题？

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