小鼠脑组织淋巴细胞分离后流式检测

爱科学 · 发表于 2020-6-8 20:13:50

本帖最后由爱科学于 2020-6-8 20:16 编辑

大家好，

最近在做小鼠脑组织淋巴细胞分离并进行流式检测CD3、CD4、CD8，但是一直很不顺利。小鼠脑组织分离后机械研磨，随后30%和70%percoll分离获得单个核细胞，进行流式检测。请问前辈，下图哪一群是淋巴细胞呢？还是压根就没得到淋巴细胞？

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爱科学 · 发表于 2020-6-8 20:14:47

本帖最后由爱科学于 2020-6-8 20:16 编辑

家的感觉 · 发表于 2020-6-9 08:21:58

爱科学发表于 2020-6-8 20:14

可以上个脾细胞或外周血获得的细胞，看细胞的位置，一致的话应该就是你要的细胞

爱科学 · 发表于 2020-6-10 16:52:26

这是我外周血染色的结果

爱科学 · 发表于 2020-6-10 16:54:01

这是今天又重复了一次脑组织淋巴细胞的流式结果

tiger · 发表于 2020-6-11 09:08:16

本帖最后由 tiger 于 2020-6-11 09:09 编辑

爱科学发表于 2020-6-10 16:54
这是今天又重复了一次脑组织淋巴细胞的流式结果

建议你不要密度梯度分离，既繁琐效果又不好，用CD45圈淋巴细胞。

爱科学 · 发表于 2020-6-14 14:51:45

tiger 发表于 2020-6-11 09:08
建议你不要密度梯度分离，既繁琐效果又不好，用CD45圈淋巴细胞。

不分离的话不会有很多碎片吗

niwanmao · 发表于 2020-6-14 19:13:03

爱科学发表于 2020-6-14 14:51
不分离的话不会有很多碎片吗

碎片是很容易排除的。
Ficoll分离组织的话，很多时候条件会有点轻微变化，容易导致效果不好。

爱科学 · 发表于 2020-6-17 19:48:28

niwanmao 发表于 2020-6-14 19:13
碎片是很容易排除的。
Ficoll分离组织的话，很多时候条件会有点轻微变化，容易导致效果不好。 ...

没有分离的话，全是碎片，根本无法看到细胞

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