检测肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)，酶解肿瘤后，不裂红可以么

124895811 · 发表于 2020-6-22 18:54:52

请问如果想用流式细胞术检测小鼠肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)，酶解肿瘤后，不裂红，直接加抗体可以么，如果不裂红对结果会有什么负面影响么

niwanmao · 发表于 2020-6-23 12:20:01

肿瘤组织有很多红细胞浸润吗？
一般酶解之后，最常用的Ficoll提取，相对活力较好，用氯化铵裂解液，也是比较柔和。

shig07 · 发表于 2020-6-23 15:03:45

小鼠皮下肿瘤里面红细胞很少的，可以不用裂红

124895811 · 发表于 2020-6-23 19:02:05

可以不提取单核细胞，制成单细胞悬液、过滤后，直接上抗体么~小鼠的黑色素瘤(B16-F10)，可能算是肿瘤里相对红细胞多一些的肿瘤~

niwanmao · 发表于 2020-6-24 08:42:04

124895811 发表于 2020-6-23 19:02
可以不提取单核细胞，制成单细胞悬液、过滤后，直接上抗体么~小鼠的黑色素瘤(B16-F10)，可能算是肿瘤里相对 ...

如果Ficoll分得好，可以用Ficoll分。
如果分不好，用氯化铵裂解液裂解，这种裂解液比较温和，不易伤害细胞组成。

shig07 · 发表于 2020-6-24 09:59:59

124895811 发表于 2020-6-23 19:02
可以不提取单核细胞，制成单细胞悬液、过滤后，直接上抗体么~小鼠的黑色素瘤(B16-F10)，可能算是肿瘤里相对 ...

B16可以不考虑红细胞，不会影响分析的，此外，这个肿瘤是胶状的，取下来后直接用移液管吹散就可以制成单细胞悬液

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