改变抗体浓度后，还需要重新调补偿吗

晴儿

各位老师好：有一个问题想要请教各位：之前用单染管已经调节好补偿了，现在感觉一个抗体浓度过高，想要改变抗体浓度，需要再次调节补偿吗？ 谢谢

niwanmao

不用。

晴儿

niwanmao 发表于 2020-10-29 08:01
不用。

谢谢老师！

骑猪上高速

niwanmao 发表于 2020-10-29 08:01
不用。

倪老师，电压、滴定、补偿的关系以及先后顺序是什么？我是这样理解的：未知最优量时，先电压，然后滴定和补偿的先后可以随意。电压变了补偿会变。浓度改变不用调补偿，电压改变，同一个抗体的最优浓度不变。这样对吗？

niwanmao

骑猪上高速 发表于 2020-10-30 19:35
倪老师，电压、滴定、补偿的关系以及先后顺序是什么？我是这样理解的：未知最优量时，先电压，然后滴定和 ...

不用纠结这么多。补偿都是可以离线调节的，所以只要把电压调节到位即可。电压的优化，站内以前讲过，可以利用微球，也可以用专业仪器。

闷油瓶

niwanmao 发表于 2020-10-30 20:24
不用纠结这么多。补偿都是可以离线调节的，所以只要把电压调节到位即可。电压的优化，站内以前讲过，可以 ...

老师，请教一个问题，电压很重要，会影响细胞的分群，所以举个例子，比如我想检测CD3、CD8、CD19这些指标，假设分别需要用到1、2、3这三个通道。

问题一：是不是我得用这三个指标的单染去通过阴阳细胞的分群分别设置好三个通道的电压？
问题二：设置电压之后，电压不就不能动了嘛，这个时候上阴性细胞让阴性细胞分布到合理的区域，这个时候的电压微调应该是可以的吧？

问题三：因为咱们正常建立一个模板都是先调电压后调补偿，那这个调电压是否同时是同时进行了通道电压设置和上阴性细胞时电压的设置？

niwanmao

闷油瓶 发表于 2021-5-21 17:09
老师，请教一个问题，电压很重要，会影响细胞的分群，所以举个例子，比如我想检测CD3、CD8、CD19这些指标 ...

1、有条件是可以。如果不具备分群好的条件，可用8峰微球，参考电压那篇帖子调节。
2、尽量不动，可微调。
3、电压影响的是整个通道，不是只针对阳性或阴性群。

闷油瓶

niwanmao 发表于 2021-5-21 22:15
1、有条件是可以。如果分群好的条件，可用8峰微球，参考电压那篇帖子调节。
2、尽量不动，可微调。
3、电 ...

好的，多谢