人全血单核细胞设门

qiulinluo

旧贴链接：
人全血单核细胞、组织巨噬细胞检测方案和设门
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-8331-1-1.html
(出处: 流式中文网)

                               
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人全血单核细胞设门：

                               
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非常抱歉，之前不熟悉，发错版块，以后注意。
问题：想请教一下各位老师，为什么用CD3/CD20排除T/B细胞，NK细胞呢，不需要排除吗？ CD8在这里的作用是？

niwanmao

NK如果通过这里的CD16排除的话，容易导致后面的单核CD14/CD16里面非经典单核就没了。
所以，NK是可以通过CD14/CD16双阴性排除掉的。
CD8的作用就是为了排除部分NK，如果你把CD8和CD56放一个通道，我觉得会更好。

qiulinluo

niwanmao 发表于 2020-12-20 09:37
NK如果通过这里的CD16排除的话，容易导致后面的单核CD14/CD16里面非经典单核就没了。
所以，NK是可以通过CD ...

这个panel没有CD20，染了CD19，按上述圈门，最后gating出CD14 vs CD16散点图，P1门的细胞来源于淋巴细胞，我需要计算经典/中间/非经典单核细胞亚群占monocytes的百分比，但是现在无法圈出纯的单核细胞。

niwanmao

qiulinluo 发表于 2020-12-21 17:02
这个panel没有CD20，染了CD19，按上述圈门，最后gating出CD14 vs CD16散点图，P1门的细胞来源于淋巴细胞 ...

你这里分群还是不错的，我的建议是按照如下红色门这样圈出总单核，然后再分析经典型和非经典型的比例。

qiulinluo

niwanmao 发表于 2020-12-22 15:26
你这里分群还是不错的，我的建议是按照如下红色门这样圈出总单核，然后再分析经典型和非经典型的比例。

...

那左边CD14-的细胞亚群不算单核细胞吗？因为我最后需要计算经典/非经典细胞亚群占单核细胞亚群的比例。   P1主要来源于淋巴细胞，CD14-CD16-亚群主要来源于单核细胞。   如果按照红色门圈出总单核，那经典/非经典亚群占单核细胞的比例计算会偏高

niwanmao

qiulinluo 发表于 2020-12-23 14:22
那左边CD14-的细胞亚群不算单核细胞吗？因为我最后需要计算经典/非经典细胞亚群占单核细胞亚群的比例。   ...

CD14-CD16-不是单核细胞。

qiulinluo

niwanmao 发表于 2020-12-23 20:02
CD14-CD16-不是单核细胞。

老师，CD14-C16+这群细胞主要来源于淋巴细胞，但是也有部分单核细胞，我想得到比较纯的总单核细胞，可以怎么排除？

niwanmao

qiulinluo 发表于 2020-12-24 18:32
老师，CD14-C16+这群细胞主要来源于淋巴细胞，但是也有部分单核细胞，我想得到比较纯的总单核细胞，可以 ...

你上面橙色的区域，单核其实是忽略不计了，甚至可以认为不是单核了。
如果你还是纠结于此，那么加CD7排除呗

qiulinluo

niwanmao 发表于 2020-12-24 20:23
你上面橙色的区域，单核其实是忽略不计了，甚至可以认为不是单核了。
如果你还是纠结于此，那么加CD7排除 ...

好的，谢谢老师