周期检测与倍体分析

iamqingmianyang

倪老师及各位站友：我从网上看见一个帖子，说检测肿瘤细胞周期时，只能检测出不同倍体细胞在G0/G1、S、G2/M期的不同比例，但具体是几倍体检测不出来。我的目的就是看周期分布，因为是肿瘤细胞肯定倍体异常。按原理说都应该能检测，求助各位解释。还有，用BD盒子能否不用内参照，光调试参数？

兔子赵

具体几倍体就是做DNA指数吧，可以做的
DI=样品GOG1期细胞峰均道数/正常2倍体GOG1峰平均道数
然后你查下  DI范围对应的倍体

niwanmao

几倍体怎么可能检测不出来呢？完全可以。但关键是你需要在标本中加入正常的二倍体对照，或者加入鸡红细胞作为倍体参照物。

不用参照当然可以，但关键是需要你知道这标本的倍体。

孙思源

问：

对一个胃癌患者癌组织进行DNA倍体分析，加入患者本人的淋巴细胞，可以吗？对吗？
还是分开来做？

niwanmao

孙思源 发表于 2011-5-1 00:25

                               
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问：

对一个胃癌患者癌组织进行DNA倍体分析，加入患者本人的淋巴细胞，可以吗？对吗？

是想用他的淋巴细胞作为正常的二倍体对照？可以，但是用鸡红细胞最标准。

孙思源

倪老师好，是的。

一个学生要做。能再具体地指导一下吗？

我昨晚注册，谢谢

孙思源

倪老师，可不可以把淋巴细胞和癌组织、癌旁组织分别用BD 的A、B、C法来染，然后用MODIFIT 软件分别分析，求的各自G1、S、G2期的值然后计算DI呢？

那天我把一个正常人的淋巴细胞和另外一个患者的癌组织匀浆后的细胞混在了一起做，................

期待老师指导

PI染色时间，您那边多长时间呢？完全按照BD的说明来做吗？许多文献说要30MIN，请老师指导啊！

niwanmao

孙思源 发表于 2011-5-1 09:20

                               
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倪老师，可不可以把淋巴细胞和癌组织、癌旁组织分别用BD 的A、B、C法来染，然后用MODIFIT 软件分别分析，求 ...

做的时候可以设置两管，一管是患者癌组织，另一管是正常淋巴细胞和癌组织以1：1混合。

只要你调整好参数，Modfit可以自动计算你所说的这些数值。

我是完全按照说明书做的，从A液加进去开始计算，是差不多30分钟吧（A液孵育10分钟，再加入B液10分钟，最后加入C液，避光10分钟）。这个试剂盒效果还不错的。