cyclin D1

于倩倩

cyclin D1  流式细胞术如何检测？通过普通的破膜打孔行不通,请高手支招。

niwanmao

于倩倩 发表于 2011-5-10 10:18

                               
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cyclin D1  流式细胞术如何检测？通过普通的破膜打孔行不通,请高手支招。

cyclinD1是核内标记，需要破细胞核的破膜剂。我经过试验之后，发现可以购买FoxP3的破膜剂，同样适合于Cyclin D1。

于倩倩

老师 破膜打孔之后还需要细胞刺激后再在二氧化碳培养箱中培养吗？因为查了一篇文献说需要扩增 不知道老师知道这方面的资料吗？

niwanmao

于倩倩 发表于 2011-5-10 11:26

                               
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老师 破膜打孔之后还需要细胞刺激后再在二氧化碳培养箱中培养吗？因为查了一篇文献说需要扩增 不知道老师知 ...

即收即做。不需要再培养。
扩增是PCR的事情，不是流式的范围。

于倩倩

老师，您好 ：不知道您用过Triton X-100/曲拉通X-100配成0.25％体积浓度用来破膜的吗？不知道效果如何？因为看到有些文章写得cyclinD1用乙醇固定用这个破膜。还有一个破膜剂Intraprep Permeabilization (immunotech france),不知道老师用过没有？
谢谢

niwanmao

于倩倩 发表于 2011-5-11 10:49

                               
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老师，您好 ：不知道您用过Triton X-100/曲拉通X-100配成0.25％体积浓度用来破膜的吗？不知道效果如何？因 ...

自己配的很难做好。当然你可以试试。

Intraprep Permeabilization这个我记得也是做胞内的破膜剂，不是破核的。

我前面说了，破核的目前比较成熟的就是foxP3的破膜剂。

于倩倩

好的 谢谢