请教几个CD3峰值的问题

闷油瓶 · 发表于 2021-4-11 16:52:05

老师您好，新来的小白，请教几个问题。。我测量NK流式，指标CD3和CD56，为什么CD3的阴性峰和阳性峰都快叠到一起了，这是什么原因呢？CD3的阴性峰和阳性峰原本应该分开吗？还有，我用同一个染色的标本测量了两次，CD3两次的结果差距很大，这是为啥？是因为有的细胞没有被染上导致的吗？

niwanmao · 发表于 2021-4-11 21:50:02

1、抗体滴定，确定抗体最佳浓度，实现CD3的完美分群。
2、两次结果差异如此之大，就得考虑你的染色步骤或操作细节上，存在很大的问题。所以目前还是考虑你的操作问题可能性会比较大。

闷油瓶 · 发表于 2021-4-12 08:41:18

niwanmao 发表于 2021-4-11 21:50
1、抗体滴定，确定抗体最佳浓度，实现CD3的完美分群。
2、两次结果差异如此之大，就得考虑你的染色步骤或操 ...

我们是细胞制备企业的日常检测，所以这个浓度是一直沿袭下来的，没有滴定过，怎么滴定呢，看不懂您之前发的文章，还有染色步骤有问题吗这是，我们是加上抗体和细胞之后，避光孵育20分钟就直接上机了

niwanmao · 发表于 2021-4-12 18:22:36

闷油瓶发表于 2021-4-12 08:41
我们是细胞制备企业的日常检测，所以这个浓度是一直沿袭下来的，没有滴定过，怎么滴定呢，看不懂您之前发 ...

滴定步骤在这个帖子里面说的很详细了，不可能看不懂啊：
总说滴定，你滴一个给我看看
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5746-1-1.html
(出处: 流式中文网)

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[结构和原理] 请教几个CD3峰值的问题