关于凋亡检测实验的实验步骤问题

闷油瓶

看了流式测凋亡的帖子，就拿下面链接中的帖子来说吧。

问题1：实验中都染了哪些管呢？是不是：不染色的空白管、单染管、阳性对照管和实验管这些？
问题2：阳性对照管是干啥用的？
问题3：单染管的细胞是不是和阳性对照用到的细胞一样，是不是来自人工诱导处理的细胞？

https://www.flowcyto.cn/bbs/foru ... amp;_dsign=da82760d

niwanmao

1、对于新手来说，全部设置，会对操作质量会有数，有助于结果的准确。
2、阳性对照，主要是能够将AV和PI单阳和双阳群都能染出来，保障设门正确。
3、都是同一种细胞

闷油瓶

niwanmao 发表于 2021-6-27 19:44
1、对于新手来说，全部设置，会对操作质量会有数，有助于结果的准确。
2、阳性对照，主要是能够将AV和PI单 ...

好的，谢谢老师。还有，我看不太懂那个帖子里的步骤，步骤7和步骤8的目的是什么？我怎么感觉着两步是多余的呢？

niwanmao

闷油瓶 发表于 2021-6-27 19:47
好的，谢谢老师。还有，我看不太懂那个帖子里的步骤，步骤7和步骤8的目的是什么？我怎么感觉着两步是多余 ...

如果对仪器非常熟悉，7、8两步看上去确实是 多余的。但如果这类细胞你从未做过，或者仪器未操作过，就有必要了，否则你直接上样本，来不及调节条件，就很可能把一些细胞信号切掉。

闷油瓶

niwanmao 发表于 2021-6-28 16:08
如果对仪器非常熟悉，7、8两步看上去确实是 多余的。但如果这类细胞你从未做过，或者仪器未操作过，就有 ...

好的好的，老师，检测凋亡的时候得把物理参数的门设大一点，那么还有必要设置阈值排除碎片吗？直接用门排除碎片可以吗？