CD4CD8

heybibna · 发表于 2021-9-10 19:50:35

我做的是胸腺，脾，血中CD4 CD8 7AAD三染，之前师兄师姐没用CD3,想问一下我的处理方法怎么圈出CD4 CD8双阳双阴单阳单阴的门？下面是圈门图和fcs文件，请教一下

niwanmao · 发表于 2021-9-11 08:31:45

你们做科研的总是犯同样的问题，放图的时候，坐标上抗体名称总是不写。当你们求助或发文章的时候，如何让其它人判断或帮助你？获取数据的时候，就理应在每个通道上注明抗体名称。

heybibna · 发表于 2021-9-14 13:35:56

本帖最后由 heybibna 于 2021-9-14 13:46 编辑

niwanmao 发表于 2021-9-11 08:31
你们做科研的总是犯同样的问题，放图的时候，坐标上抗体名称总是不写。当你们求助或发文章的时候，如何让其 ...

实在抱歉老师，因为之前没做过，这方面文献看的也少，所以对这个不是太了解，下面这两个图是脾脏和血只敷了CD4CD8做的，想问一下老师怎么能圈出CD4CD8双阳双阴单阳单阴的门？近两年文献都做的是三染或者四染，但是因为之前的师兄师姐只做了CD4CD8没有做CD3，结果也出来了，所以我做的时候按照之前师兄师姐双染的做法做了，可是结果怎么也出不来，想请教一些老师我这个应该怎么圈门？

niwanmao · 发表于 2021-9-15 07:52:36

heybibna 发表于 2021-9-14 13:35
实在抱歉老师，因为之前没做过，这方面文献看的也少，所以对这个不是太了解，下面这两个图是脾脏和血只敷 ...

看了下血的数据，那两群阳性的是CD4+和CD8+T，但是不加CD3的话，这个比例是不准确的，因为根据FSC/SSC圈的时候，里面混了很多红细胞碎片，所以需要加CD3，先圈CD3+T细胞，然后再分析CD4和CD8的比例。

heybibna · 发表于 2021-9-15 08:31:54

好的老师，血的数据能通过圈门方式，尽量靠近真实值吗，因为数据已经出了一大批了，当时抗体也不好订，所以匆匆忙忙没设计好实验，我还需要这批数据毕业，

还有脾的数据有问题吗，老师这个圈门我也不太确定，想问您一下正确的是怎么圈门的？

niwanmao · 发表于 2021-9-15 14:25:40

heybibna 发表于 2021-9-15 08:31
好的老师，血的数据能通过圈门方式，尽量靠近真实值吗，因为数据已经出了一大批了，当时抗体也不好订，所以 ...

不太容易。除非你用CD4:CD8比值作为结果了。

heybibna · 发表于 2021-9-15 16:48:45

niwanmao 发表于 2021-9-15 14:25
不太容易。除非你用CD4:CD8比值作为结果了。

那老师我要看CD4CD8比值的话，应该怎么圈啊？

niwanmao · 发表于 2021-9-15 21:02:38

heybibna 发表于 2021-9-15 16:48
那老师我要看CD4CD8比值的话，应该怎么圈啊？

先将CD4和CD8的补偿调到位，然后再圈那两群单阳性的细胞。

wxd · 发表于 2021-9-23 13:03:22

本帖最后由 wxd 于 2021-9-23 13:11 编辑

不知道楼主有没有做CD4单染和CD8单染，没有的话，最好能补一下，然后把补偿调整到位。答辩委员会虽然不太可能看你的原始数据，但论文中直接放没有调整补偿的数据还是不严谨。

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