T细胞基因敲除后检测B2M

stubborn

两个人同时进行实验，出的结果图里其他的图都相同，只有一张图不同，用的相同的模板，电压（SSC略有不同），荧光补偿。但是出现的结果图却不同，现已排除抗体加样量的影响，请问一下大家还有什么可能原因会导致这种结果？

niwanmao

电压能确定相同？抗体用量呢？

bslhk

是同一台机器测得？样本量也一样吗？

stubborn

niwanmao 发表于 2021-9-14 07:30
电压能确定相同？抗体用量呢？

链接的是同一个荧光补偿，所以电压是相同的，抗体是按照1：20的比例配置的，另外一个人是15μL抗体加285，我的是15μL抗体加300，这个影响也没那么大，抗体孵育过程应该也是没有问题的，因为其他图都是正常的。

stubborn

bslhk 发表于 2021-9-14 08:17
是同一台机器测得？样本量也一样吗？

是的，同一台仪器先后测的，测完之后对了实验记录本数据，样本量是相同的，而且其他图也是正常的，出的结果也差不多，就只有这一个图不一样。

niwanmao

stubborn 发表于 2021-9-14 08:49
链接的是同一个荧光补偿，所以电压是相同的，抗体是按照1：20的比例配置的，另外一个人是15μL抗体加285 ...

如有可能，将FCS文件压缩成zip文件传上来，我们细看一下。有时候可能你们不经意调了啥参数，有时候可能仪器一过性的问题，从FCS文件或许能看到一些蛛丝马迹。

stubborn

niwanmao 发表于 2021-9-14 11:24
如有可能，将FCS文件压缩成zip文件传上来，我们细看一下。有时候可能你们不经意调了啥参数，有时候可能仪 ...

公司生产的产品，完整文件可能不太方便哈，不过老师也给了我思路，我去比对下两个FCS文件的参数。感谢！