3个panel是否可能？

kq2016829 · 发表于 2022-2-24 16:30:30

CD4+T：CD45+CD3+CD4+
CD8+T：CD45+CD3+CD8+
Treg：CD45+CD4+CD25+FoxP3
NK：CD45+CD3-NK1.1+
CD8+功能分子：IFN-y,TNF-a，Lag3，PD-1，TIGIT，Tim3
M1：CD45+CD11b+F4/80+CD86
M2: CD45+CD11b+F4/80+CD206
DC：CD45+CD11c MHCII
G-MDSC: CD11b+Gr1+Ly6G+
M-MDSC: CD11b+Gr1+Ly6+

请问老师：以上圈门逻辑用thermo的流式细胞仪（通道路）上用3个penal是否可行？

niwanmao · 发表于 2022-2-24 20:37:28

你指的是分成三管吗？

kq2016829 · 发表于 2022-2-28 23:05:22

niwanmao 发表于 2022-2-24 20:37
你指的是分成三管吗？

是的，如此配色是否可行？如何优化？

niwanmao · 发表于 2022-3-1 08:59:02

kq2016829 发表于 2022-2-28 23:05
是的，如此配色是否可行？如何优化？

可以的。

kq2016829 · 发表于 2022-3-3 18:39:32

niwanmao 发表于 2022-3-1 08:59
可以的。

老师，penal2、3中CD3在肿瘤组织中表达量很低，APC-cy7的荧光强度能分开吗？如何优化比较好呢？

scaleus · 发表于 2022-3-3 19:10:25

kq2016829 发表于 2022-3-3 18:39
老师，penal2、3中CD3在肿瘤组织中表达量很低，APC-cy7的荧光强度能分开吗？如何优化比较好呢？ ...

加了CD45就可以我用的就是APCCY7

kq2016829 · 发表于 2022-3-3 22:22:49

scaleus 发表于 2022-3-3 19:10
加了CD45就可以我用的就是APCCY7

您用的肿瘤组织嘛？每百万细胞加多少抗体？

kq2016829 · 发表于 2022-3-3 22:27:14

scaleus 发表于 2022-3-3 19:10
加了CD45就可以我用的就是APCCY7

制作单细胞悬液时是否加消化酶？可否分享一下protocol？第一次独立做流式，很多拿不准。感谢！

scaleus · 发表于 2022-3-6 20:41:54

kq2016829 发表于 2022-3-3 22:22
您用的肿瘤组织嘛？每百万细胞加多少抗体？

我们是研磨的不加消化酶我们只取1-2x10^6细胞染色抗体用量跟平时是一样的

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