请问如何做PE/FITC ratio的直方图

woodylock

如文献中所示，横坐标为PE/FITC ratio的直方图该怎么做呢？我在网上和流式技术支持那里都没找到解决方法，还请老师指教，谢谢！

niwanmao

woodylock 发表于 2022-3-14 13:32
谢谢老师，这样可以统计出柱状图，但文献左图那种像是在流式直接做出的，我感觉是BD Diva里有ratio功能， ...

左侧那种，Flowjo里面可衍生出新的参数，将该参数计算公式定为PE  MFI/ FITC MFI，即可绘制该参数的直方图，就是这样子的。

woodylock

文献图请见附件

niwanmao

不知道你这里指的是什么指标。从字面意思看，应该是直接将PE的MFI除以FITC 的MFI，除出来的得数，在统计学软件（如GraphPad Prism）里面绘制直方图

woodylock

谢谢老师回复！这是检测过氧化脂质的染料，它的还原形式在PE发光，被氧化后在FITC发光。我看染料说明书也给的是red/green ratio。我还想请教一下老师，如何用graphpad做这种双通道比值的直方图呢？

woodylock

niwanmao 发表于 2022-3-12 19:53
不知道你这里指的是什么指标。从字面意思看，应该是直接将PE的MFI除以FITC 的MFI，除出来的得数，在统计学 ...

谢谢老师回复！这是检测过氧化脂质的染料，它的还原形式在PE发光，被氧化后在FITC发光。我看染料说明书也给的是red/green ratio。我还想请教一下老师，如何用graphpad做这种双通道比值的直方图呢？

niwanmao

woodylock 发表于 2022-3-14 10:49
谢谢老师回复！这是检测过氧化脂质的染料，它的还原形式在PE发光，被氧化后在FITC发光。我看染料说明书也 ...

大致步骤是这样的：
1、在流式上，分别在流式图的统计信息那里，找到FITC的MFI和PE的MFI，记在Excel上，前面加一列标本编号，后面加一列比值，然后录入公式计算FITC MFI和PE MFI之间的比值。
2、将Excel数据导入或复制粘贴到GraphPad Prism里面，按比值，绘制统计图，即可有柱形和误差线出来。

woodylock

niwanmao 发表于 2022-3-14 13:24
大致步骤是这样的：
1、在流式上，分别在流式图的统计信息那里，找到FITC的MFI和PE的MFI，记在Excel上， ...

谢谢老师，这样可以统计出柱状图，但文献左图那种像是在流式直接做出的，我感觉是BD Diva里有ratio功能，但我没有研究出来，我先统计MFI看看结果，再次谢谢老师回复！

woodylock

niwanmao 发表于 2022-3-14 13:38
左侧那种，Flowjo里面可衍生出新的参数，将该参数计算公式定为PE  MFI/ FITC MFI，即可绘制该参数的直方 ...

多亏老师指导，我终于知道左侧图怎么做出来了。原来是在flowjo→tools→derive parameters里改变参数轴。