小白求助

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人外周树突细胞

Yuck

21世纪了兄弟，学会应用工具啊，优宁维，达科为等试剂服务商都提供免费配色服务，你直接找他们不就行了。自己能看懂理解原理，然后判断她们配色结果行不行得通就行了。那还用得着自己一个一个学啊，流式都发展多少年啦。除非你的靶点很特殊需要自己搞。

niwanmao

因为不知道你们所用的机型，具体配置如何，所以没法帮你做组合。
不过，从这里要检测的指标看，CD11c、CD80、CD86、MHCII、PD-1、CD3、CD4、CD8、CD25这些表面标记是至少需要的，然后胞内标记包括IL-10、IL-12、MMP8（这个指标我不知道理解的对不对，是不是一个炎性因子？）、foxP3（Treg），这些标记肯定无法放在一管，因为Canto II机器最多10色。

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niwanmao 发表于 2022-3-22 16:54
因为不知道你们所用的机型，具体配置如何，所以没法帮你做组合。
不过，从这里要检测的指标看，CD11c、CD80 ...

非常谢谢老师回复！

niwanmao

460675602@qq.co 发表于 2022-3-25 00:09
非常谢谢老师回复！
1、现在这台仪器我知道的有PE/APC/fitC/PE-CY7通道，可能是3色8or9通道，还在确认。
...

1、按你这个描述，这是2激光4色？
2、MMP8你这个指标的全称是什么？这个很重要，不要是别的指标了。如果按你查的结果，这就是直标抗体。

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niwanmao 发表于 2022-3-25 08:22
1、按你这个描述，这是2激光4色？
2、MMP8你这个指标的全称是什么？这个很重要，不要是别的指标了。如果 ...

感谢老师回复！

niwanmao

460675602@qq.co 发表于 2022-3-27 23:06
感谢老师回复！看了理论还是不懂，不好意思再问一下。
现在决定只测CD11chighMMP8+细胞比例和数量，以及C ...

1、初步电压控制：不染色的细胞。
2、Fc受体阻断后，染CD11c（FITC）、MHC II （APC），明确MHC II的阴阳分界。（虽然APC和其它两个通道理论上不应该存在干扰，但实际上还是做一下）
3、Fc受体阻断后，染CD11c（FITC）、MMP8（PE） ，明确MHC II的阴阳分界。
4、Fc受体阻断后，染CD11c（FITC）、MMP8（PE） 、MHC II （APC），分析数据。

Climber

https://www.thermofisher.cn/order/panel-builder/#!/
thermo提供的配色工具，能兼顾市面上大多的流式仪器

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niwanmao 发表于 2022-3-28 07:59
1、初步电压控制：不染色的细胞。
2、Fc受体阻断后，染CD11c（FITC）、MHC II （APC），明确MHC II的阴阳 ...

谢谢老师回复！感谢！

460675602@qq.co

460675602@qq.co 发表于 2022-4-11 20:48
谢谢老师回复！感谢！
现在需要我自己决定抗体，CD11c（FITC）和MMP8（PE）都用BD，MHCII大多选择HLA-DR ...

https://www.thermofisher.cn/cn/z ... 6-42?imageId=127147
https://www.bdbiosciences.com/zh ... human-hla-dr.559868