荧光配色求助

不停

各位老师，我最近想检测肿瘤组织中的Treg细胞以及细胞毒性T细胞，选了以下标志物和配色，想请各位大佬帮忙看看可不可以，主要是后面调补偿好调不

APC/Cyanine7  anti-mouse CD45 Antibody

FOXP3 Monoclonal Antibody (FJK-16s), PE

Zombie Aqua™ Fixable Viability  Kit

PE/Dazzle™ 594 anti-mouse CD4  Antibody

PE/Cyanine7 anti-mouse CD25  Antibody

APC anti-mouse TNF-α Antibody

FITC anti-mouse Perforin  Antibody

Alexa Fluor® 700 anti-mouse  IFN-γ Antibody

PerCP anti-mouse CD8a Antibody

niwanmao

首先要强调的是，发帖请务必发到以下4个版块，不要放在分享版块：
1、基础问题（如仪器、原理、试剂耗材、软件等）
2、临床检测方面（如免疫分型、淋巴细胞亚群等）
3、科研方面（如周期、凋亡、线粒体、DC、巨噬等）
4、流式分选和磁珠分选
此次先帮你转移过去，下不为例哦。


Perforin需要用强一点的荧光。可以跟IFN-γ换一下位置

不停

niwanmao 发表于 2022-3-28 20:24
首先要强调的是，发帖请务必发到以下4个版块，不要放在分享版块：
1、基础问题（如仪器、原理、试剂耗材、 ...

谢谢老师，我之前没注意，不好意思！

liuruiluna

现在看补偿应该会不小。如果想问配色配的怎么样，最好把仪器配置的激光和通道放上来，这样可以看看有没有别的通道可以调整

吹散的蒲公英

liuruiluna 发表于 2022-4-1 15:04
现在看补偿应该会不小。如果想问配色配的怎么样，最好把仪器配置的激光和通道放上来，这样可以看看有没有别 ...

看楼主写的配色，我怀疑他可能刚好就只有两激光7色，应该是把全部荧光通道占满了。

liuruiluna

吹散的蒲公英 发表于 2022-4-2 09:08
看楼主写的配色，我怀疑他可能刚好就只有两激光7色，应该是把全部荧光通道占满了。 ...

是啊  我觉得如果想提优化的意见 只好先再确认下仪器配置通道  

如果有人呼唤

各位老师好，想请教一下这样的荧光素搭配合理吗？谢谢

niwanmao

如果有人呼唤 发表于 2022-7-29 23:58
各位老师好，想请教一下这样的荧光素搭配合理吗？谢谢

这么说吧，基本上方案一开始都是先选择克隆号，其次再定荧光素，而荧光素的确定，一般也不是一次就能定下来的，而是不断摸索（Euroflow方案也都是这么完善出来的）。

所以，我的建议，只要方案是合理的，你就先做，中间表现不好的指标，再换抗体。

如果有人呼唤

niwanmao 发表于 2022-7-30 11:05
这么说吧，基本上方案一开始都是先选择克隆号，其次再定荧光素，而荧光素的确定，一般也不是一次就能定下 ...

好的明白啦，谢谢老师！