ICS实验阴性对照细胞异常信号？

cnynjn2007 · 发表于 2022-6-22 15:11:48

做胞内因子刺激实验，同时设置了阴性对照（DMSO）、实验组（抗原肽刺激）和阳性对照组（PHA），在CD4CD8双轴图中看到阴性对照细胞右上角出现一些异常信号，如下图中红色箭头所指示的地方，因为已经圈过活细胞了，所以这是自发荧光还是别的什么信号呢？请各位老师指点，感谢！

niwanmao · 发表于 2022-6-22 21:39:06

非特异性信号，常见于多色流式，可能是染料粘连引起的异常信号，可单独去除。

cnynjn2007 · 发表于 2022-7-4 19:46:27

niwanmao 发表于 2022-6-22 21:39
非特异性信号，常见于多色流式，可能是染料粘连引起的异常信号，可单独去除。 ...

请问倪老师，单独去除是要怎么操作呢

niwanmao · 发表于 2022-7-4 20:36:28

cnynjn2007 发表于 2022-7-4 19:46
请问倪老师，单独去除是要怎么操作呢

另外圈一个门，去除这些信号。
平时做的时候，染料尽量选择常见的染料，避开这些紫光通道的染料（这些染料可能需要特殊的染色缓冲液才会比较稳定）。

cnynjn2007 · 发表于 2022-7-4 20:39:04

niwanmao 发表于 2022-7-4 20:36
另外圈一个门，去除这些信号。
平时做的时候，染料尽量选择常见的染料，避开这些紫光通道的染料（这些染 ...

好呢，了解啦，谢谢倪老师的解答！

lukequ · 发表于 2023-6-30 22:48:33

niwanmao 发表于 2022-7-4 20:36
另外圈一个门，去除这些信号。
平时做的时候，染料尽量选择常见的染料，避开这些紫光通道的染料（这些染 ...

老师怎么看哪些是紫光通道的染料

niwanmao · 发表于 2023-7-1 07:42:29

lukequ 发表于 2023-6-30 22:48
老师怎么看哪些是紫光通道的染料

Brilliant Violet系列染料。

其他你看染料激发波长405nm左右的聚合物染料，应该也存在类似问题。

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