ICS实验细胞分群异常？

cnynjn2007

还是ICS实验，用相同的样本做了2次重复实验，同样的处理，同样的电压和补偿，分析CD4+T细胞的同一个因子（IFN-γ）时第二次实验出现右边这种情况，原来第一次实验（左图）阴性群就只有一群，第二次实验时却发现阴性群好像变成了两群，请问这是什么原因阿，请各位老师指点，多谢啦！

niwanmao

刺激程度不同，可能导致细胞群体出现不同的本底荧光。

cnynjn2007

niwanmao 发表于 2022-7-4 20:36
刺激程度不同，可能导致细胞群体出现不同的本底荧光。

倪老师，我的两次实验所使用的刺激条件是一样的，只是样本是冻存的PBMC细胞，同一个人的样本冻存了多管，即使是同一个人的样本，是不是因为复苏后细胞状态不一致所导致的刺激程度不同呢？

cnynjn2007

niwanmao 发表于 2022-7-4 20:36
刺激程度不同，可能导致细胞群体出现不同的本底荧光。

那请问倪老师像这样的结果能用吗，会被认可吗

niwanmao

cnynjn2007 发表于 2022-7-4 20:51
那请问倪老师像这样的结果能用吗，会被认可吗

1、可以
2、如果是多色流式，确认一下邻近通道的补偿。

cnynjn2007

niwanmao 发表于 2022-7-4 21:11
1、可以
2、如果是多色流式，确认一下邻近通道的补偿。

好的，谢谢倪老师的解答！