小鼠脾脏液氮冻存后还能分离出PBMC么

intron2001 · 发表于 2022-7-6 15:59:52

小鼠脾脏液氮冻存后还能分离出PBMC么？望有经验的同仁回答，如能告知注意事项不胜感激！

niwanmao · 发表于 2022-7-6 16:07:51

是将小鼠脾脏整个冻在液氮里面了？没有经过程序化降温吗？

intron2001 · 发表于 2022-7-6 21:47:51

因为没有经验，难道是应该4度1小时，-20度1小时，-80度过夜，然后转至液氮么，这样就可以提取PBMC了么？谢谢管理员

niwanmao · 发表于 2022-7-7 08:17:04

intron2001 发表于 2022-7-6 21:47
因为没有经验，难道是应该4度1小时，-20度1小时，-80度过夜，然后转至液氮么，这样就可以提取PBMC了么？谢 ...

也不是，我的意思是，如果当初有这样降温，可能会稍微好一点，但风险也是比较大。没有程序化降温的话更加没希望恢复了。

最好是取出后马上解离成单细胞，然后Ficoll分离，将分出的活的单个核细胞，程序化降温冻存。

intron2001 · 发表于 2022-7-9 12:36:54

昨日已分离，请问分离后的PBMC应用程序化降温后将来复苏的活性和人的PBMC复苏后应该差不多么？

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