ROS检测给药组比对照组平均荧光强度值低

zhouyuanyuan · 发表于 2022-7-8 10:38:40

老师，我的药理论上应该是增加ROS水平的，可是流式测出来平均荧光强度低于对照组，能麻烦您帮忙分析一下原因吗

niwanmao · 发表于 2022-7-8 10:54:45

你的实验步骤详细描述一下是怎么样的？

zhouyuanyuan · 发表于 2022-7-8 10:59:05

niwanmao 发表于 2022-7-8 10:54
你的实验步骤详细描述一下是怎么样的？

对照组使用千分之一DMSO加DMEM，加药组是药物加DMEM，都处理6h后加入碧云天的ROS试剂盒染料，避光孵育20min，无血清DMEM清洗3遍，加入胰酶1min吸取胰酶弃去，加入PBS收集细胞过滤上机检测，用的是贝克曼的流式细胞仪，FITC通道

niwanmao · 发表于 2022-7-8 11:10:41

zhouyuanyuan 发表于 2022-7-8 10:59
对照组使用千分之一DMSO加DMEM，加药组是药物加DMEM，都处理6h后加入碧云天的ROS试剂盒染料，避光孵育20m ...

“对照组使用千分之一DMSO加DMEM，加药组是药物加DMEM”

这个步骤里面用的是否无血清DMEM？药物必须要处理这么长时间？

zhouyuanyuan · 发表于 2022-7-8 11:56:32

niwanmao 发表于 2022-7-8 11:10
“对照组使用千分之一DMSO加DMEM，加药组是药物加DMEM”

这个步骤里面用的是否无血清DMEM？药物必须要处 ...

是无血清的，因为药物有6种，处理时间都是6小时，其他5种结果都是预期结果，就这种药物结果相反

niwanmao · 发表于 2022-7-8 20:50:03

zhouyuanyuan 发表于 2022-7-8 11:56
是无血清的，因为药物有6种，处理时间都是6小时，其他5种结果都是预期结果，就这种药物结果相反 ...

那么最好再重复个三次。有可能是一次偶然。

zhouyuanyuan · 发表于 2022-7-10 11:50:23

niwanmao 发表于 2022-7-8 20:50
那么最好再重复个三次。有可能是一次偶然。

好的，谢谢老师

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