细胞凋亡图不理解

frozenflying · 发表于 2017-10-20 10:31:27

流式凋亡实验，用Annexin V-FITC和PI染色，我的实验组一直存在问题，不理解图片成这样说明什么问题所有组同样处理，奥沙利铂组100uM处理4h，我的药物组也是，做了不同时间点的4h，6h，12h，我的药物组都是一直对角线

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frozenflying · 发表于 2017-10-20 10:32:51

补充一下，我的阳性组是用的60水浴3min的，我的AV和PI的单染组也是同样的方法做的

frozenflying · 发表于 2017-10-20 11:11:03

@niwanmao，倪老师，求助

frozenflying · 发表于 2017-10-20 23:47:53

求各位指点一下

robert1988 · 发表于 2017-10-21 03:19:15

我不知道怎么回事哈，我只是留个名关注一下大家的回复

Helen_ztt · 发表于 2017-10-21 10:16:08

frozenflying 发表于 2017-10-20 10:32
补充一下，我的阳性组是用的60水浴3min的，我的AV和PI的单染组也是同样的方法做的 ...

我也是初学，也来关注回复的~好奇问一下阳性组为什么用60度水浴的办法？

ghqiu09 · 发表于 2017-10-21 10:16:10

我觉得画门还是有点问题，要么就是按照阳性组的那一小群画（不管后面的奥沙利铂还是你的药物，对应的位置都有一小群细胞的），要么横轴要更靠右一点，纵轴需要稍微抬高一点。

ghqiu09 · 发表于 2017-10-21 10:17:01

我比较倾向于后者的化门方法

frozenflying · 发表于 2017-10-21 10:41:46

Helen_ztt 发表于 2017-10-21 10:16
我也是初学，也来关注回复的~好奇问一下阳性组为什么用60度水浴的办法？ ...

我也是新手，之前咨询的BD的技术支持，她建议可以用水浴60度，高温加速坏死是已知的，所以可以有阳性结果，不过我有看到文献用etoposide和H2O2分别作为AV和PI的阳性

frozenflying · 发表于 2017-10-21 10:48:07

ghqiu09 发表于 2017-10-21 10:17
我比较倾向于后者的化门方法

其实我也尝试过将十字门向右上侧偏移，但是这样的话，我的阳性组位置就明显不对了，很大一部分都到了左上的门里面去了。
其实我也很疑惑，为什么我的药物组一直都是这样的梭型的，和空白组完全不一样，我有点怀疑我药物组不是促凋亡的，而是促坏死的。

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