CD8 T 胞内染色方法

xusmilemen

想染CD8 T内的颗粒酶、穿孔素、IFNγ、ki-67、以及表面的CD107a，没有找到合适的protocol。请问各位老师，需要加PIB吗，CD107a什么时候加呢？

niwanmao

PIB是啥？
CD107a的染色参见：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4931065/

其它标记都是需要破膜的。

xusmilemen

niwanmao 发表于 2019-10-9 22:54
PIB是啥？
CD107a的染色参见：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4931065/

谢谢倪老师，PMA，ionomycin，Brefeldin A，偷懒了，就写成了 PIB，染胞内的这些marker需要加这些吗，还有就是记得之前看过您一篇帖子，关于对照的，里面提到了 生物学对照 FMO 和Isotype。生物学对照是指没加PIB的细胞吗？

niwanmao

xusmilemen 发表于 2019-10-10 08:12
谢谢倪老师，PMA，ionomycin，Brefeldin A，偷懒了，就写成了 PIB，染胞内的这些marker需要加这些吗，还 ...

是的

xusmilemen

niwanmao 发表于 2019-10-11 08:11
是的

谢谢倪老师！我这几天一直被一个问题困扰，就是到底加不加PMA和离子霉素的问题，问了很多师兄师姐，大多数的回答就是染胞内的试验现在都这么做。
但是我还是不太明白加和不加的区别，加了之后还能反映出疾病本身的状态吗？如果不加，又担心信号太弱，如果不加可不可以只用BFA和莫能菌素孵育4-6小时，这样是不是更直接反应疾病中的特点？如果加了PMA和离子霉素是不是反应的是这些细胞体外的功能？