植物倍性检测对照

Veblen

想问老师，在做倍性检测时为什么经常要用到鸡红细胞核作为参照物呢？
就算成一定规律，那怎么通过及红细胞核染色荧光与实验组DNA荧光比较,怎么会具有可比性呢，就不知道实验的基因组是几倍体了啊
谢谢老师

niwanmao

哺乳动物的用鸡红细胞参照，因为鸡红细胞是有核的，而且倍性恰好是单倍体，非常均一。

如果做植物，你就得用已知倍体的植物去做参照，而不是鸡红细胞。

Veblen

niwanmao 发表于 2020-3-23 07:51
哺乳动物的用鸡红细胞参照，因为鸡红细胞是有核的，而且倍性恰好是单倍体，非常均一。

如果做植物，你就得 ...

那为什么经常用鸡红细胞做线性呢？这个线性指的就平均荧光强度了吧，是根据细胞数的比例关系去呈现相应的总的荧光强度吧，可以这样理解吗；
另怎么去做倍性的对照呢，其他哺乳动物的细胞就算有单倍体，染色后与鸡红细胞荧光强度也不会一样，没有可比性啊；

niwanmao

Veblen 发表于 2020-3-27 01:28
那为什么经常用鸡红细胞做线性呢？这个线性指的就平均荧光强度了吧，是根据细胞数的比例关系去呈现相应的 ...

这是由核酸含量决定的，前人做过很多工作，已经明确了鸡红细胞和鳟鱼红细胞是很好的单倍体参照。

sunzheng_99

1 做样本的倍体性和细胞周期分析时，建议做三管平行分析管：一管二倍体标准品，一管未知样本与二倍体标准品的混合样本，以及一管未知样本。对于肿瘤样本来说，理想的二倍体标准品是与其组织类型相同的正常组织。另一个二倍体标准品是外周血单个核细胞（PBMCs）。
2 鸡红细胞也可
3 给你作参考

Veblen

sunzheng_99 发表于 2020-3-27 11:18
1 做样本的倍体性和细胞周期分析时，建议做三管平行分析管：一管二倍体标准品，一管未知样本与二倍体标准品 ...

为啥要做一管混合样本呢？

niwanmao

Veblen 发表于 2020-3-28 20:10
为啥要做一管混合样本呢？

只有做这三管，才能准确地确定二倍体峰的位置。

Veblen

niwanmao 发表于 2020-3-29 11:45
只有做这三管，才能准确地确定二倍体峰的位置。

好的，理解了。