分选后细胞不活/收集到细胞少了一半

vinnie

vinnie

没来得及写问题：
1、分选后细胞存活很少，位置什么都调整正确的，分的时候发现细胞主群不明显，但是荧光通道上看还是有分群的；
2、分选后收集到的细胞相比之前少了一半，但是处理都是和之前一样的，不过有新建模板圈门。
仪器半个月前堵了一次，不过解决了，请问有遇到类似情况的用户嘛？主要是样本的问题还是仪器的问题呀？
谢谢。

niwanmao

vinnie 发表于 2023-3-21 16:27
没来得及写问题：
1、分选后细胞存活很少，位置什么都调整正确的，分的时候发现细胞主群不明显，但是荧光通 ...

分选前的细胞总量、目的细胞比例，都能保证一致吗？
总感觉应该有蛮多因素决定的吧。

mybiosciences

细胞来源是什么（是否组织，是否经过消化）？分选前细胞状态如何？有没有加死活染料？
请上流式图

vinnie

做的比较好的一次

上次少了一半的一次

我自己简单看了一下，好像不好的这次主群就不多，所以p5的数量就少了；然后做了很多次都还是按照第一次的电压补偿分的，感觉是不是也要根据每次实验调整一下呢？

niwanmao

vinnie 发表于 2023-3-23 15:20
我自己简单看了一下，好像不好的这次主群就不多，所以p5的数量就少了；然后做了很多次都还是按照第一次的 ...

第二次明显可见大量碎片，说明样本状态明显不如上一次，这样出现的数量减少，这不是很正常？
只要确保细胞活力，就能解决。

vinnie

niwanmao 发表于 2023-3-23 20:14
第二次明显可见大量碎片，说明样本状态明显不如上一次，这样出现的数量减少，这不是很正常？
只要确保细 ...

好的，谢谢倪老师！总担心是仪器的问题