关于Treg细胞标记问题

niwanmao

想做Treg细胞方面的实验，但由于机器老话还是别的原因，APC光路有些偏，染料不想用APC的，但咨询了工程师，他说fitc pe  percp这三种染料在一起可能因为补偿方面问题结果不好，没太理解，假若CD4标PerCP   CD25  标FITC   FOXP3标PE还会有问题吗？恳请指教  提问者: bravegao1979  提问时间: 10-07-29 11:16

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marina的答案
FITC PE PerCP 这三个荧光通过488纳米的激光激发后，都会有荧光补偿的，跟结合的CD抗原的选择是没有关系的。
你的实验方案可以试一下，先用两两双标的调好补偿，调好后测测看，可以试一下，应该没有问题。

niwanmao的答案
marina说的没错。按照我们的经验FITC跟PERCP没补偿，而PE跟PerCP的补偿还是能够调好的，能够检测。
反而是PerCP跟APC补偿调不好。


zhouyongbao的答案
呵呵，这三种荧光肯定可以在一起用的，但要注意PE和PERCP补偿的调节，但PERCP的荧光不是很强，建议采用PC5标记的代替PERCP